| Summary: | La primera evidencia de la existencia del péptido intestinal vasoactivo (VIP) se remonta a 1967, fecha en la que SAMI SAID, descubre en extractos acuosos de pulmón actividad vasoactiva, vasodilatadora e hipotensiva (SAID y MUTT, 1969). SAID trata de aislar la sustancia vasoactiva y utiliza para ello extractos intestinales que habían evidenciado igualmente actividad vasodilatadora (SAID y MUTT, 1970). Estos hechos dieron lugar al aislamiento y purificación del VIP a partir del intestino delgado del cerdo (SAID y MUTT, 1972), lo que supuso el inicio de una extensa investigación para comprender y explicar el papel fisiológico jugado por el VIP. Se detectó inmunoreactividad para VIP en varias regiones del aparato digestivo, pensando entonces, que pudiera ser una hormona gastrointestinal y/o un péptido de acción local o paracrina (POLAK, 1974). Posteriormente, el descubrimiento de VIP en determinadas zonas del sistema nervioso central (SNC) como los cuerpos, axones y dentritas neuronales (GIACHETTI et al., 1977), su hallazgo en terminaciones presinápticas (JOHANSSON y LUNDERG, 1981) y su abundancia en córtex cerebral, amígdala, núcleo estriado, núcleo supraquiasmático, ganglios simpáticos, nervio vago, nervio ciático y en otras localizaciones del sistema nervioso central y periférico (LARSSON et al., 1976; HOKFELT et al., 1982) hicieron que comenzara a verse el VIP como un neuropéptido con funciones neuromoduladoras o neurotrasmisoras (GOYAL et al., 1980; ROSSLIN et al., 1982); punto de vista que fue confirmado por la caracterización de receptores para VIP en numerosas zonas del SNC (ROBBERECHT et al., 1978; STAUN-OLSEN et al., 1982). Pronto se descubrieron también receptores para VIP en diversas células del sistema inmune. Se hallaron receptores en células mononucleares sanguíneas humanas (GUERRERO et al., 1981; OTTAWAY et al., 1983; DANEK et al., 1983), en monocitos humanos (WIIK et al., 1985), en células linfoides humanas y de rata (CALVO et al., 1986a y 1986b) y en diferentes líneas celulares de estirpe linfoblástica (BEED et al., 1983; ROBBERECHT et al., 1988b). Observándose, que el VIP influye en la fisiología de los linfocitos T (OTTAWAY, 1984), en la síntesis de inmunoglobulinas (STANISZ et al., 1986) o en la función de las células NK (ROLA-PLESZCZYNSKI et al., 1985). A partir de aquí, el VIP empieza a ser considerado como un péptido modulador de la función inmune dentro de un eje neuroinmunoendocrino (FANTINI et al., 1985). De igual modo que se avanza en el esclarecimiento del papel fisiológico del VIP, se profundiza en el estudio del macrófago y su función en la respuesta inmune. Se verifica, que es preciso que el macrófago procese previamente a los antígenos para después presentarlos a los linfocitos (TREVES et al., 1976), y de igual modo se observa que los macrófagos, secretan unas sustancias que modulan la respuesta inmune y que se denominan monocinas. Al mismo tiempo se caracterizan en monocitos circulantes y en células presursoras de los macrófagos tisulares, receptores para diferentes neuropéptidos y hormonas: insulina y glucagón (BLECHER y GOLDSTEIN, 1977), parathormona (PERRY et al., 1984), neurotensina y sustancia P (BAR-SHAVIT y GOLDMAN, 1986), receptores que pueden intervenir en la regulación de determinadas funciones del macrófago. Teniendo en cuenta el papel modulador del VIP en el eje neuroinmunoendocrino (TSENG y O’DORISIO, 1989), así como la función que ejerce el macrófago en el inicio y desarrollo de la respuesta inmune, y una vez conocida la existencia de receptores para Vip en macrófagos peritoneales de rata (SEGURA et al., 1991), plantemos la hipótesis de que el macrófago de ratón también expresara receptores específicos para el VIP, a través de los cuales, dicho péptido pudiera modular alguna de sus funciones. Varios estudios han implicado al Vip como péptido inmunoregulador y han sido identificados receptores específicos de alta afinidad en diversas células del sistema inmune, entre ellas el macrófago. Dichos receptores han sido caracterizados funcionalmente usando 125I-VIP como radioligando en experimentos de unión y molecularmente mediante experimentos de “cross-linking” covalente. Se ha evidenciado que la acción del VIP esta medida por la activación de la adenilato ciclasa, produciéndose un incremento de los niveles intracelulares de AMPc. Diversos trabajos realizados en ratones han demostrado que el VIP modula diferentes funciones de células del sistema inmune de este anima, así como demuestran la existencia de receptores para VIP en linfocitos y en células T de ratón. Sin embargo, no existe evidencia respecto a la presencia de receptores para el VIP en macrófagos murinos. Por otra parte, han sido descritos diferentes antagonistas para el VIP, y se han realizado estudios para demostrar este efecto antagonista en diferentes órganos de diversos animales. Sin embargo, con respecto a los antagonistas para el Vip en células del sistema inmune, existe muy poca información disponible. Teniendo en cuenta estos antecedentes, se pensó realizar este trabajo de investigación, con la intención de comprobar las siguientes hipótesis: a) La existencia en los macrófagos peritoneales de ratón de receptores específicos para VIP. b) Demostrar que el AMPc es el segundo mensajero del VIP en los macrófagos peritoneales de ratón. c) Demostrar el efecto de los antagonistas específicos del Vip en el macrófagos peritoneal de ratón. Para llevar a cabo los puntos anteriormente enumerados es necesario proponer los siguientes OBJETIVOS FUNDAMENTALES: I) Caracterización funcional de los receptores para el VIP en el macrófago peritoneal de ratón. II) Caracterización del sistema efector del VIP en el macrófago peritoneal de ratón. III) Caracterización molecular de los receptores para el VIP en el macrófago peritoneal de ratón. IV) Caracterización del sistema receptor-efector antagonista del VIP en el macrófago peritoneal de ratón.
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