| Summary: | Dissertação de Mestrado em Segurança Alimentar apresentada à Faculdade de Farmácia Giardia e Cryptosporidium são dois protozoários que infetam o homem e animais, tendo sido detetados com alguma frequência em moluscos bivalves. Ambos parasitas têm ciclos de vida adequados para que haja infeção e transmissão por via hídrica e pelos alimentos. Os quistos de Giardia e os ooquistos de Cryptosporidium são as formas infetantes e são muito resistentes às condições ambientais e aos tratamentos químicos efetuados à água para consumo humano. Estas estruturas de resistência permanecem viáveis na água durante meses podendo contaminar o homem e animais bem como a fauna aquática nomeadamente moluscos bivalves.Em Portugal é escassa a pesquisa destes protozoários em alimentos. Assim, o presente trabalho teve como objetivo pesquisar Giardia e Cryptosporidium em moluscos bivalves através de técnicas moleculares e fazer uma análise do risco alimentar para a saúde pública associado ao consumo destes moluscos. Ostras de três espécies, Ostrea edulis, Crassostrea gigas e Crassostrea angulata, foram recolhidas em diferentes zonas de Portugal pelo Instituto Português do Mar e da Atmosfera (IPMA) no período de 2011 a 2017. O ADN das ostras (n=190) foi extraído utilizando-se o kit DNeasy Blood & Tissue (Qiagen) e a deteção de Giardia e Cryptosporidium foi realizada por técnicas de PCR (nested-PCR e qPCR). A identificação das espécies e genótipos foi realizada por sequenciação.O locus do gene ssu rRNA de Giardia foi amplificado por nested-PCR em 29 amostras de ostras (15,3%). Destas 29 amostras positivas, só 12 amostras foram sequenciadas com sucesso. O alinhamento das sequências identificou a espécie Giardia lamblia em todas as amostras com 99-100% de homologia com sequências de referência. Através do estudo das posições nucleotídicas foram caracterizadas 10 amostras no genótipo A. Recorrendo ao qPCR específico dos genótipos A e B, genótipos responsáveis pela doença no homem, foi possível identificar o genótipo A de Giardia lamblia ...
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