| Summary: | Tesis (Doctor en Biotecnología) La anemia infecciosa del salmón (ISA) es una enfermedad viral que afecta a peces, especialmente a especies en cultivo como el salmón del Atlántico (Salmo salar). Es causada por el virus ISA que pertenece al género lsavirus de la familia Orthomyxoviridae y es considerado un patógeno emergente que ha causado importantes pérdidas económicas a la industria salmonera chilena. En este trabajo se desarrolló un primer prototipo de vacuna recombinante contra el virus y se estudió sus propiedades inmunogénicas y capacidad de protección. Genes de las cuatro principales proteínas estructurales del virus fueron diseñados y sintetizados con una secuencia optimizada para su expresión en bacterias. Mediante esta estrategia, se expresó en E. colí, la proteína de matriz (M1 ), un fragmento de la mitad amino terminal de la nucleoproteína (N-NP), fragmentos de las mitades amino y carboxilo terminal de la proteína hemaglutinina-esterasa (N-HE y C-HE, respectivamente), un fragmento de la mitad amino terminal de la proteína de fusión (N-FP) y otro fragmento (FP3) que abarca dominios de la región amino y carboxilo de la proteína de fusión. A excepción de la proteína de matriz que se expresa tanto en su forma denaturada como en forma nativa, las demás proteínas se producen en la forma de cuerpos de inclusión. Mezclas de las proteínas recombinantes fueron formuladas y sus propiedades inmunogénicas se determinaron en conejos y en salmones. Los anticuerpos policlonales desarrollados en conejos fueron evaluados por ELISA, detectándose títulos de anticuerpos altos contra las proteínas N-NP y M1. Luego se evaluó la capacidad de estos anticuerpos de neutralizar el efecto citopático del virus en células en cultivo, detectándose un grado de neutralización evidente con el suero de un conejo inmunizado con la mezcla de las proteínas recombinantes NNP, NFP2, NHE, CHE y M1 desnaturadas, muy semejante a la neutralización observada con el suero policlonal contra la proteína M1 nativa. Este resultado es concordante con ...
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