Expresión de enzimas antioxidantes en Sterechinus neumayeri: caracterización de la respuesta frente a estrés térmico agudo

Tesis (Ingeniero en Biotecnología) El océano Austral ha permanecido a bajas y constantes temperaturas durante millones de años. Esta condición ambiental ha permitido albergar organismos marinos adaptados a temperaturas frías. Sin embargo, las temperaturas extremadamentes frías junto con la alta conc...

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Bibliographic Details
Main Author: Font Mascareño, Alejandro Felipe
Other Authors: González Aravena, Jorge Marcelo, Escuela de Ingeniería en Biotecnología
Format: Thesis
Language:Spanish
Published: Universidad Andrés Bello 2018
Subjects:
Online Access:http://repositorio.unab.cl/xmlui/handle/ria/18557
Description
Summary:Tesis (Ingeniero en Biotecnología) El océano Austral ha permanecido a bajas y constantes temperaturas durante millones de años. Esta condición ambiental ha permitido albergar organismos marinos adaptados a temperaturas frías. Sin embargo, las temperaturas extremadamentes frías junto con la alta concentración de oxígeno, debido a su mayor solubilidad, podría producir una alta tasa de oxidación debido a la formación de especies reactivas de oxígeno (ROS). Un cambio en las temperaturas del océano antártico puede generar un aumento de las especies oxígeno reactivas, ocasionando un desbalance de éstas y en consecuencia generando un estrés oxidativo. Es sabido que las especies polares tienen dificultades para responder a cambios abióticos, entre ellos a la temperatura. Sin embargo, son poco conocidos los mecanismos involucrados en la respuesta a estrés térmico y oxidativo en organismos clave para los ecosistemas marinos, tales como el erizo antártico Sterechinus neumayeri. Es por esto que es de especial interés estudiar en esta especie dos de los genes que codifican para las principales enzimas involucradas en los mecanismos de estrés térmico, como son la Superóxido dismutasa y la Catalasa. Utilizando una aproximación por RACE PCR se logró obtener el marco abierto de Sn-SOD y Sn-CAT. El análisis in silico de las secuencias, evidenciaron un alto nivel de conservación de los sitios activos de estas con respecto a otros invertebrados y mamíferos. Sustituciones puntuales de aminoácidos con cadenas laterales voluminosas o con cargas, estarían involucrados en la capacidad catalítica a bajas temperatura. A través de PCR en tiempo real y ELISA indirecto fue posible medir la variación de transcrito y proteína a lo largo del desafío térmico. Los resultados experimentales obtenidos luego de la exposición a 3°C y 5ºC, revelan homogeneidad en la respuesta al estrés térmico por parte de los individuos analizados. La respuesta se caracterizó por la incapacidad de aumentar la expresión de transcrito durante los intervalos medidos, ...