Bioprospec??o de metab?litos bioativos produzidos por fungos endof?ticos associados a angiospermas presentes na Ant?rtica.

Apesar das rela??es ecol?gicas, evolutiva e do potencial biotecnol?gico de muitos microrganismos, pouco se conhece da micota presente no continente Ant?rtico. Desta forma, este trabalho teve como objetivo detectar a presen?a de metab?litos bioativos produzidas por fungos endof?ticos associados as an...

Full description

Bibliographic Details
Main Author: Santiago, Iara Furtado
Other Authors: Rosa, Luiz Henrique, Rosa, Carlos Augusto
Format: Other/Unknown Material
Language:Portuguese
Published: Programa de P?s-Gradua??o em Ci?ncias Biol?gicas. N?cleo de Pesquisas em Ci?ncias Biol?gicas, Pr?-Reitoria de Pesquisa e P?s Gradua??o, Universidade Federal de Ouro Preto. 2011
Subjects:
Online Access:http://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/3155
Description
Summary:Apesar das rela??es ecol?gicas, evolutiva e do potencial biotecnol?gico de muitos microrganismos, pouco se conhece da micota presente no continente Ant?rtico. Desta forma, este trabalho teve como objetivo detectar a presen?a de metab?litos bioativos produzidas por fungos endof?ticos associados as angiospermas ant?rticas Deschampsia antarctica Desv. (Poaceae) e Colobanthus quitensis quitensis (Kunth) Bartl. (Caryophyllaceae). Dos 564 isolados de fungos endof?ticos, 251 foram obtidos de C. quitensis e 313 de D. antarctica. Estes fungos foram cultivados em Agar Batata Dextrosado por 15 dias a 15?C para obten??o dos extratos brutos. Os 477 extratos obtidos foram avaliados quanto a prolifera??o celular das linhagens de c?lulas tumorais humanas MCF-7 (gl?ndula mam?ria), UACC-62 (melanoma) e TK-10 (renal); e de formas amastigota de Leishmania amazonensis e Trypanosoma cruzi. Ap?s a triagem, seis extratos foram ativos sobre a prolifera??o de pelo menos uma das linhagens de c?lulas tumorais. Destes, quatro extratos apresentaram inibi??o sobre MCF-7, um sobre TK-10 e um sobre UACC-62. Nenhum extrato foi ativo para duas ou mais linhagens de c?lulas tumorais, sugerindo uma seletividade dos extratos testados. Vinte sete extratos obtidos de fungos associados a D. antarctica foram ativos contra L. amazonensis. Nenhum extrato foi capaz de inibir o crescimento de T. cruzi. Todos os isolados ativos foram identificados por meio do sequenciamento da regi?o espa?adora transcrita interna (ITS) do gene do rRNA. Os seguintes g?neros foram identificados: Alternaria, Cadophora, Helgardia, Microdochium, Phaeosphaeria, Oculimacula e Ypsilina. Os extratos de dois isolados de Microdochium phragmitis (UFMGCB 2479 e UFMGCB 2656) apresentaram os menores valores de CI50 (8 e 12,5 ?g/mL, respectivamente) sobre as linhagens de c?lulas tumorais. Os extratos dos t?xons UFMGCB 2672 (n?o identificado) e Phaeosphaeria sp. UFMGCB 2669 foram ativos sobre L. amazonensis com valores de CI50 de 0,2 e 0,4 ?g/mL, respectivamente. Os resultados obtidos neste estudo contribuem para o conhecimento do potencial biotecnol?gico da micota endof?tica associadas a plantas end?micas do ecossistema ant?rtico. Estes fungos podem representar uma fonte promissora de metab?litos prot?tipos para o desenvolvimento de novas drogas, em especial contra doen?as negligenciadas. Despite the ecological and evolutionary relationships and biotechnological potential of many microorganisms, little is known about this mycota from the Antarctic continent. Since, this study aimed to detect the presence of bioactive metabolites produced by endophytic fungi associated with the antarctic angiosperms Deschampsia antarctica Desv. (Poaceae) and Colobanthus quitensis quitensis (Kunth) Bartl. (Caryophyllaceae). From 564 isolates of endophytic fungi, 251 were obtained from C. quitensis and 313 from D. antarctica. These fungi were grown on potato dextrose agar for 15 days at 15oC to obtain crude extracts. The 477 extracts were evaluated for cellular proliferation of tumor cell lines MCF-7 (mammary gland), UACC-62 (melanoma cells) and TK-10 (renal cells) and amastigote Leishmania amazonensis and Trypanosoma cruzi. After screening, six extracts were active on the proliferation of at least one tumor cell line. Of these, four extracts showed inhibition of MCF- 7, one showed inhibition of TK-10 and one of UACC-62. No extract was active for two or more tumor cell lines, suggesting a selectivity of the extracts. Twenty seven extracts of fungi associated with D. antarctica were active against L. amazonensis. No extract was able to inhibit the growth of T. cruzi. All isolates were identified by sequencing the internal transcribed spacer (ITS) region of rRNA gene. The following genera were identified: Alternaria, Cadophora, Helgardia, Microdochium, Phaeosphaeria, Oculimacula and Ypsilina. The extracts of two isolates of Microdochium phragmitis (UFMGCB 2479 and UFMGCB 2656) had the lowest IC50 values (8 and 12,5 ?g/mL, respectively) on the tumor cell lines. The extracts of the unidentified taxa UFMGCB 2672 and of Phaeosphaeria sp. UFMGCB 2669 were active against L. amazonensis with IC50 values of 0,2 e 0,4 ?g/mL, respectively. The results of this study contribute to the knowledge of the biotechnological potential of endophytic mycota associated with endemic plants of the Antarctic ecosystem. These fungi may represent a promising source of metabolites prototypes for the development of new drugs, especially against neglected diseases.