Quantificação de Listeria monocytogenes em filé de salmão (Salmo salar) pronto para o consumo por PMA-qPCR e sua sobrevivência durante a simulação gastrointestinal in vitro

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos, Florianópolis, 2019. Considerando suas propriedades nutricionais, os produtos de pescado se tornaram uma escolha mais saudável, aumentando seu consumo no Brasil...

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Bibliographic Details
Main Author: Barretta, Clarissa
Other Authors: Prudêncio, Elane Schwinden, Universidade Federal de Santa Catarina
Format: Doctoral or Postdoctoral Thesis
Language:Portuguese
Published: 2019
Subjects:
Online Access:https://repositorio.ufsc.br/handle/123456789/220382
Description
Summary:Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos, Florianópolis, 2019. Considerando suas propriedades nutricionais, os produtos de pescado se tornaram uma escolha mais saudável, aumentando seu consumo no Brasil e no mundo. Em função disso, o hábito do consumo de peixe cru, com destaque especial ao Salmão do Atlântico (Salmo salar), tem se tornado cada dia mais comum. Isso, no entanto, pode trazer riscos à população, em função da possível persistência de importantes patógenos, como Listeria monocytogenes. A ampla capacidade de adaptação deste patógeno a ambientes desfavoráveis tem causado preocupação para órgãos fiscalizadores, indústrias e consumidores ao redor do mundo. Dessa forma, estudos sobre o comportamento de L. monocytogenes frente a desafios, como os presentes na passagem pelo trato gastrointestinal, podem ser determinantes na busca por soluções eficientes visando o seu controle. Além disso, métodos rápidos e confiáveis para a quantificação deste patógeno em produtos alimentares são essenciais. Assim, este estudo consistiu na quantificação de células viáveis de L. monocytogenes em amostras comerciais e artificialmente contaminadas de salmão pronto para o consumo, utilizando Propidio Monoazida (PMA) associado ao PCR quantitativo (PMA-qPCR). Foi possível observar neste estudo que o uso de PMA antes da extração de DNA para amplificação por qPCR pode ser uma alternativa promissora para quantificação de L. monocytogenes nestes alimentos. Isso porque esse protocolo reduz a replicação de DNA de células mortas, evitando falsos positivos, superando assim a maior limitação para o uso de qPCR em alimentos. Além disso, ao comparar os resultados do método PMA-qPCR com os obtidos através de um método de cultivo dependente, ficou claro que os métodos baseados em DNA são capazes de fornecer resultados mais rápidos e seguros. Esse fato pôde ser corroborado também através de uma análise do comportamento e da capacidade de ...