Efecto de organismos productores de toxinas PSP y DSP en la expresión de genes de respuesta inmune en juveniles de Crassostrea gigas (Thunberg, 1793)

Crassostrea gigas, es la especie de ostión más cultivada en el mundo, constituye un modelo biológico de gran importancia económica. Desde 1993 se han registrado mortalidades recurrentes en las principales zonas del cultivo y aunque se han identificado episodios de Florecimientos Algales Nocivos (FAN...

Full description

Bibliographic Details
Main Author: ANA KARINA KAO GODINEZ
Other Authors: NORMA YOLANDA HERNANDEZ SAAVEDRA
Format: Master Thesis
Language:Spanish
Published: Centro de Investigaciones Biológicas del Noroeste, S.C. 2015
Subjects:
FAN
PSP
DSP
Aun
Online Access:http://cibnor.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1001/226
Description
Summary:Crassostrea gigas, es la especie de ostión más cultivada en el mundo, constituye un modelo biológico de gran importancia económica. Desde 1993 se han registrado mortalidades recurrentes en las principales zonas del cultivo y aunque se han identificado episodios de Florecimientos Algales Nocivos (FAN) previos a estos episodios de mortalidad, no se ha podido establecer aun una clara correlación. En el litoral Mexicano, el impacto de los FAN de dinoflagelados tóxicos sobre diversas especies marinas, entre ellas los moluscos bivalvos, es un fenómeno que se ha observado con mayor frecuencia. En el presente trabajo se expusieron a juveniles de 3-5 mm de C. gigas a una combinación de los dinoflagelados Prorocentrum lima y Gymnodinium catenatum productores de toxinas DSP y PSP respectivamente, obteniendo el perfil de expresión de distintos genes relacionados con la respuesta inmune y el sistema defensa (lgbp, tlp, inm, if44, cp1 y cvt). En el bioensayo se consideraron como variables el tiempo de exposición ( 1, 3, 5 y 7 días) y la combinación de tres concentraciones celulares de dinoflagelados tóxicos, TR1 (G.catenatum 3X103 cel mL-1 y P.lima 3X102 cel mL-1), TR2 (G.catenatum 1.5X103 cel mL-1 y P.lima 1.5X103 cel mL-1) y TR3 (G.catenatum 3X102 cel mL-1 y P.lima 3X103 cel mL-1), empleando Isochrysis galbana (7.5X105 cel mL-1) como alimento para el grupo control C1. El estudio de la expresión se llevó a cabo mediante la técnica de qPCR. Se realizó la validación de los genes de referencia, para estas condiciones experimentales, siendo TUB, ACT y GAPDH los más estables con base en los algoritmos utilizados (GeNorm, NormFinder). La exposición de los ostiones a G. catenatum y P. lima provocó un aumento en el nivel de transcripción de genes que codifican proteínas implicadas en la respuesta inmune, principalmente en los tratamientos donde P. lima se encontraba mayormente disponible. Por lo cual, los cambios a nivel transcripcional de los genes monitoreados fueron tiempo-tratamiento dependientes. En general, estos cambios sugieren una relación directa con la ingestión de los diferentes concentraciones de dinoflagelados tóxicos en cada tratamiento [.] Crassostrea gigas is one of the most cultured marine species in the world because it is a biological model of great economic importance. Since 1993, recurring mortalities have taken place in the main farming areas of cultivation. Although episodes of harmful algal blooms (HABs) before mortality events have been identified, a clear correlation has not been established yet. In the Mexican coast, the impact of HABs from toxic dinoflagellates on various marine species, including bivalve mollusks, is a phenomenon frequently observed. In this work, we exposed 3-5 mm C. gigas juveniles to the dinoflagellates Prorocentrum lima and Gymnodinium catenatum, DSP and PSP toxin producers, respectively, obtaining a gene expression profile in different gene groups related to immune response and defense system (lgbp, tlp, inm, if44, cp1, and cvt). In the bioassay, exposure time (1, 3, 5, and 7 d) and the combination of three cell concentrations of toxic dinoflagellates were considered as variables: TR1 (G. catenatum 3 X 103 cel mL-1 and P. lima 3 X 102 cel mL-1); TR2 (G. catenatum 1.5 X 103 cel mL-1 and P. lima 1.5 X 103 cel mL-1); and TR3 (G. catenatum 3 X 102 cel mL-1 and P. lima 3 X 103 cel mL-1) using Isochrysis galbana (7.5 X 105 cel mL-1) as feed for the control group C1. The study of the expression was performed by qPCR. Validation of reference genes was performed with TUB, ACT and GAPDH more stable based on the algorithms used (GeNorm, NormFinder) for these experimental conditions. The exposure of the oysters to G. catenatum and P. lima caused an increase in the transcription level of the genes encoding proteins involved in immune response, mainly in the treatments where P. lima was mostly available. Therefore, changes at the transcriptional level of the genes monitored were timetreatment dependent. In general, these changes lead to a relationship with ingestion of the different concentrations of toxic dinoflagellates in each treatment [.]