Efectos del secado en punto crítico y secado en terbutanol en el tamaño de levaduras y eritrocitos humanos
Uno de los problemas más frecuentes observados en muestras biológicas al microscopio de rastreo (SEM) es la disminución de tamaño de los especímenes, lo cual se ha asociado con el método de secado. En el caso de secado en punto crítico (SPC), esta reducción se calcula entre 20 y 80% pero, para el se...
| Published in: | Biomédica |
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| Main Authors: | , , , |
| Format: | Article in Journal/Newspaper |
| Language: | English Spanish |
| Published: |
Instituto Nacional de Salud
1995
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| Subjects: | |
| Online Access: | https://doi.org/10.7705/biomedica.v15i4.878 https://doaj.org/article/cf86993954504c5cafa2274e681b4a41 |
| Summary: | Uno de los problemas más frecuentes observados en muestras biológicas al microscopio de rastreo (SEM) es la disminución de tamaño de los especímenes, lo cual se ha asociado con el método de secado. En el caso de secado en punto crítico (SPC), esta reducción se calcula entre 20 y 80% pero, para el secado en terbutanol (STB) aún no se ha calculado. Se estudió el tamaño de las levaduras de Candida albicans y Phaeoannelomyces werneckii y de eritrocitos humanos procesados para SEM mediante SPC y STB, y contraste de fases. Las células se lavaron tres veces con amortiguador de fosfatos y se fijaron con glutaraldehído al 2,5% en el mismo amortiguador a 4°C por 2h. Se procesaron por duplicado sobre membranas policatiónicas de poli-L-lisina, se deshidrataron y se secaron en SPC y STB; se cubrieron con 200 A de oro y se analizaron al SEM (Hitachi S-570). El tamaño real se obtuvo en el microscopio de contraste de fases. Los resultados mostraron que, a pesar de las variaciones rnorfológicas presentes en las células estudiadas, hubo una disminución del 34,4 y 21,3% aproximadamente en el tamaño de los eritrocitos procesados por SPC y STB, respectivamente. Se discuten las variaciones en el tamaño del espécimen durante el procesamiento para SEM. |
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