Producción y caracterización de un anticuerpo policlonal dirigido contra la fosfoproteína del virus de la rabia
Introducción. La producción de una proteína viral recombinante facilita la aplicación de diversas metodologías bioquímicas en investigación básica de los virus con relevancia clínica. Además, la obtención de un anticuerpo policlonal dirigido contra la proteína P permite el estudio de su función y es...
Published in: | Biomédica |
---|---|
Main Authors: | , , |
Format: | Article in Journal/Newspaper |
Language: | English Spanish |
Published: |
Instituto Nacional de Salud
2007
|
Subjects: | |
Online Access: | https://doi.org/10.7705/biomedica.v27i2.221 https://doaj.org/article/350f839d64174351b317d6ed5b695afe |
id |
ftdoajarticles:oai:doaj.org/article:350f839d64174351b317d6ed5b695afe |
---|---|
record_format |
openpolar |
spelling |
ftdoajarticles:oai:doaj.org/article:350f839d64174351b317d6ed5b695afe 2023-05-15T15:12:10+02:00 Producción y caracterización de un anticuerpo policlonal dirigido contra la fosfoproteína del virus de la rabia Nadia Yadira Castañeda Jacqueline Chaparro-Olaya Jaime E. Castellanos 2007-06-01T00:00:00Z https://doi.org/10.7705/biomedica.v27i2.221 https://doaj.org/article/350f839d64174351b317d6ed5b695afe EN ES eng spa Instituto Nacional de Salud http://www.revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/221 https://doaj.org/toc/0120-4157 0120-4157 doi:10.7705/biomedica.v27i2.221 https://doaj.org/article/350f839d64174351b317d6ed5b695afe Biomédica: revista del Instituto Nacional de Salud, Vol 27, Iss 2, Pp 257-67 (2007) rabies virus immunochemistry phosphoproteins recombinant proteins Escherichia coli Medicine R Arctic medicine. Tropical medicine RC955-962 article 2007 ftdoajarticles https://doi.org/10.7705/biomedica.v27i2.221 2022-12-31T00:47:06Z Introducción. La producción de una proteína viral recombinante facilita la aplicación de diversas metodologías bioquímicas en investigación básica de los virus con relevancia clínica. Además, la obtención de un anticuerpo policlonal dirigido contra la proteína P permite el estudio de su función y está soportado en la inexistencia de un anticuerpo comercial dirigido contra esa proteína. Objetivo. Producir y caracterizar un anticuerpo policlonal dirigido contra la proteína P recombinante del virus de la rabia expresada en Escherichia coli. Materiales y métodos. El gen P que codifica para la proteína P del virus de la rabia, fue amplificado por reacción en cadena de la polimerasa de transcriptasa reversa y clonado en el vector de expresión PinPointTM Xa-1 T (PROMEGA). La proteína recombinante P fue expresada en E. coli purificada por cromatografía de afinidad y usada para la producción del anticuerpo policlonal anti-P. El anticuerpo obtenido fue purificado y caracterizado por inmunocitoquímica con un sistema enzimático, inmunofluorescencia, Cell-ELISA fluorométrica y Western blotting. Resultados. La proteína recombinante se expresó eficientemente como una proteína de fusión biotinilada de aproximadamente 50 kd, que corresponde a la forma completa de la proteína P del virus de la rabia. El anticuerpo policlonal anti-P detectó con alta especificidad la proteína P en cultivos de neuronas sensoriales infectados con el virus de la rabia. Conclusión. La proteína P recombinante expresada en E. coli se constituyó en un antígeno específico para producir un anticuerpo policlonal que reconoce la proteína P nativa en células infectadas con el virus de la rabia. Article in Journal/Newspaper Arctic Directory of Open Access Journals: DOAJ Articles Arctic Alta Cadena ENVELOPE(-67.600,-67.600,-67.450,-67.450) Biomédica 27 2 257 |
institution |
Open Polar |
collection |
Directory of Open Access Journals: DOAJ Articles |
op_collection_id |
ftdoajarticles |
language |
English Spanish |
topic |
rabies virus immunochemistry phosphoproteins recombinant proteins Escherichia coli Medicine R Arctic medicine. Tropical medicine RC955-962 |
spellingShingle |
rabies virus immunochemistry phosphoproteins recombinant proteins Escherichia coli Medicine R Arctic medicine. Tropical medicine RC955-962 Nadia Yadira Castañeda Jacqueline Chaparro-Olaya Jaime E. Castellanos Producción y caracterización de un anticuerpo policlonal dirigido contra la fosfoproteína del virus de la rabia |
topic_facet |
rabies virus immunochemistry phosphoproteins recombinant proteins Escherichia coli Medicine R Arctic medicine. Tropical medicine RC955-962 |
description |
Introducción. La producción de una proteína viral recombinante facilita la aplicación de diversas metodologías bioquímicas en investigación básica de los virus con relevancia clínica. Además, la obtención de un anticuerpo policlonal dirigido contra la proteína P permite el estudio de su función y está soportado en la inexistencia de un anticuerpo comercial dirigido contra esa proteína. Objetivo. Producir y caracterizar un anticuerpo policlonal dirigido contra la proteína P recombinante del virus de la rabia expresada en Escherichia coli. Materiales y métodos. El gen P que codifica para la proteína P del virus de la rabia, fue amplificado por reacción en cadena de la polimerasa de transcriptasa reversa y clonado en el vector de expresión PinPointTM Xa-1 T (PROMEGA). La proteína recombinante P fue expresada en E. coli purificada por cromatografía de afinidad y usada para la producción del anticuerpo policlonal anti-P. El anticuerpo obtenido fue purificado y caracterizado por inmunocitoquímica con un sistema enzimático, inmunofluorescencia, Cell-ELISA fluorométrica y Western blotting. Resultados. La proteína recombinante se expresó eficientemente como una proteína de fusión biotinilada de aproximadamente 50 kd, que corresponde a la forma completa de la proteína P del virus de la rabia. El anticuerpo policlonal anti-P detectó con alta especificidad la proteína P en cultivos de neuronas sensoriales infectados con el virus de la rabia. Conclusión. La proteína P recombinante expresada en E. coli se constituyó en un antígeno específico para producir un anticuerpo policlonal que reconoce la proteína P nativa en células infectadas con el virus de la rabia. |
format |
Article in Journal/Newspaper |
author |
Nadia Yadira Castañeda Jacqueline Chaparro-Olaya Jaime E. Castellanos |
author_facet |
Nadia Yadira Castañeda Jacqueline Chaparro-Olaya Jaime E. Castellanos |
author_sort |
Nadia Yadira Castañeda |
title |
Producción y caracterización de un anticuerpo policlonal dirigido contra la fosfoproteína del virus de la rabia |
title_short |
Producción y caracterización de un anticuerpo policlonal dirigido contra la fosfoproteína del virus de la rabia |
title_full |
Producción y caracterización de un anticuerpo policlonal dirigido contra la fosfoproteína del virus de la rabia |
title_fullStr |
Producción y caracterización de un anticuerpo policlonal dirigido contra la fosfoproteína del virus de la rabia |
title_full_unstemmed |
Producción y caracterización de un anticuerpo policlonal dirigido contra la fosfoproteína del virus de la rabia |
title_sort |
producción y caracterización de un anticuerpo policlonal dirigido contra la fosfoproteína del virus de la rabia |
publisher |
Instituto Nacional de Salud |
publishDate |
2007 |
url |
https://doi.org/10.7705/biomedica.v27i2.221 https://doaj.org/article/350f839d64174351b317d6ed5b695afe |
long_lat |
ENVELOPE(-67.600,-67.600,-67.450,-67.450) |
geographic |
Arctic Alta Cadena |
geographic_facet |
Arctic Alta Cadena |
genre |
Arctic |
genre_facet |
Arctic |
op_source |
Biomédica: revista del Instituto Nacional de Salud, Vol 27, Iss 2, Pp 257-67 (2007) |
op_relation |
http://www.revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/221 https://doaj.org/toc/0120-4157 0120-4157 doi:10.7705/biomedica.v27i2.221 https://doaj.org/article/350f839d64174351b317d6ed5b695afe |
op_doi |
https://doi.org/10.7705/biomedica.v27i2.221 |
container_title |
Biomédica |
container_volume |
27 |
container_issue |
2 |
container_start_page |
257 |
_version_ |
1766342891306745856 |