Evaluación de dos métodos para la separación de RNA mensajero de Plasmodium falciparum

• Published in: Biomédica
• Main Authors: Heidy Y. Guerrero, María Orfa Rojas, Moisés Wasserman
• Format: Article in Journal/Newspaper
• Language: English; Spanish
• Published: Instituto Nacional de Salud 1998
• Subjects: Medicine; R; Arctic medicine. Tropical medicine; RC955-962; Arctic; Baja; Partida
• Online Access: https://doi.org/10.7705/biomedica.v18i1.971; https://doaj.org/article/29e9696381514cf0be0106c9a5a1bee1

En muchos casos, el estudio de la regulación de la expresión de genes específicos, requiere el aislamiento de su RNA mensajero (mRNA) a partir del RNA total presente en la célula. Con el fin de garantizar la presencia de secuencias que se expresan en baja abundancia, es indispensable obtener preparaciones de mRNA que sean representativas de la población de mensajeros del organismo en estudio. En este trabajo se evaluó el rendimiento del mRNA de Plasmodium falciparum obtenido por dos métodos: cromatografía de afinidad en columnas de oligo dT celulosa y captura del mRNA por hibridización en solución con un primeroligo dT. Con los dos métodos, se obtuvieron rendimientos similares en un rango entre 0,7 y 1,1% con respecto al RNA total de partida. El tamaño del cDNA sintetizado a partir de mensajeros separados por cromatografía fue de 0,4 a 4 Kb, mientras que los provenientes del método de captura, permitieron un rango entre 0,4 y 8 Kb. Este hecho sugiere las mejores posibilidades que ofrece el método de captura para obtener poblaciones de mensajeros con mayores tamaños, si se compara con el método tradicional. La presencia de clones con genes de copia única como son los de tubulina, actina II, miosina, calmodulina, glucosa fosfato-isomerasa y glucosa-fosfato-deshidrogenasa, en genotecas de cDNA, permiten inferir una buena representatividad de las secuencias expresadas en la preparación de mRNA.