| Summary: | La salmonicultura es uno de los pilares de nuestra economía, de ahí laimportancia en optimizar los niveles de sanidad y producción en dicha industria.En el presente estudio hemos demostrado el efecto de diferentes dietascomerciales en parámetros de inmunidad innata de salmón, tales comofosfatasa lisosomal, peroxidada lisosomal y estallido respiratorio. Nuestrosresultados muestran la importancia de la adición de inmunoestimulantes en laalimentación para definir el estado inmunológico en peces. Por otro lado, sehace necesario la caracterización del sistema inmune, ya que de esta manerase puede optimizar y entender el mecanismo por el cual tanto enfermedadescomo inmunoestimulantes estarían ejerciendo su acción. Nuestros datossoportan la hipótesis que el sistema inmune de Salmo salar cuenta conpoblaciones linfocitarias similares a las observadas en mamíferos, tales comolinfocitos B (IgM+/MHCII+); putativas APCs (MHCII++) y putativos linfocitos T(MHCII-). Dentro de estas células existen dos subpoblaciones capaces deincorporar antígeno, un tipo celular de gran tamaño y MHCII++, que podríacorresponder a APCs y la otra corresponde a una característica particular deSalmo salar, que es la capacidad de linfoctios B de incorporar antígeno. Dado la escasez de anticuerpos para identificar las subpoblaciones mencionadas anteriormente, hemos desarrollado un sistema para detectar la presencia de APCs, haciendo uso de una de las vías coestimulatorias más comunes envertebrados superiores, como lo es la interacción entre CD40L y CD40. Envertebrados superiores, la interacción CD40L-CD40 representa una importantevía coestimualtoria, crucial para la maduración de DCs, induciendo cambiosfenotípicos y funcionales que transforman éstas células en células presentadoras de antígeno (APCs) más efectivas. Sin embargo, no existe evidencia de su conservación funcional en vertebrados inferiores, como salmón.Primeramente, hemos realizado la caracterización funcional de CD40L y CD40de Salmo salar. CD40L de salmón es una proteína de transmembrana tipo IIcon un dominio funcional homólogo a TNF en el extremo extracelular quecontiene el C-terminal, mientras que CD40 corresponde a una proteína demembrana tipo I con patrones de cuatro residuos de cisteína repetidos en suextremo N-extracelular. CD40L y CD40 se encuentran ampliamente distribuidosen diferentes órganos de Salmo salar, particularmente en órganos relacionadoscon la función immune. Así, CD40L se encuentra expresado en una fraccióncelular identificada con linfocitos y su expresión es inducida por la acción demitógenos tales como PHA y Con A. Por otro lado, CD40 es expresado encélulas con características de APCs y su expresión es inducida en presencia deCpG. Para determinar el efecto que tiene la unión de CD40L a su receptor CD40 en células de salmón, hemos co-cultivado células CHSE-214 que sobreexpresan ectópicamente CD40L con leucocitos derivados de riñón cefálico y hemos demostrado que CD40L induce una rápida y duradera (6-72h) inducción en la expresión de transcritos codificantes para importantes moléculas coestimulatorias tales como CD40, CD83 y B7-H1, además de citoquinas características de respuesta tipo helper (IFNs, IL-12p40, IL-10 y IL-1?). Interesantemente, la unión de CD40L en HKLs induce la expresión de MHCII? en la superficie de los leucocitos al tiempo que causa una disminución en su capacidad de capturar antígeno. Nuestros resultados proveen la primera evidencia de la existencia funcional de la vía coestimualtoria CD40L-CD40 enpeces y demuestran que su interacción es clave en la maduración de APCs enSalmo salar. En conjunto nuestros datos permiten el enriquecimiento en elconocimiento de la inmunidad en vertebrados inferiores, crucial para elmejoramiento en estrategias de inmunoestimulación y además permitiríadilucidar el mecanismo evolutivo del sistema inmune en vertebrados superiores.
|
|---|