| Summary: | 胃质子泵(H~+/K~+ ATPase)是胃酸分泌的关键酶。本试验采用RACE 和PCR 方法从大菱鲆的胃组织中提取RNA克隆得到了H~+/K~+ ATPase α 亚基cDNA全长序列。结果表明: 大菱鲆H~+/K~+ ATPaseα 亚基序列全长3467 bp, 开放阅读框为2964 bp, 编码988个氨基酸。与GenBank 上其它物种比对发现, 大菱鲆H~+/K~+ ATPase α 亚基与斑鳜同源性最高, 为89%。进化树分析发现, H~+/K~+ ATPase 在进化上具有物种特异性。经RT-PCR 和荧光定量PCR 检测, 大菱鲆H~+/K~+ ATPase 在胚胎孵化后22d 开始表达, 晚于大菱鲆胃腺出现的时间(16 d), 说明大菱鲆胃腺的发育完成并不代表胃功能的完善。另外, 大菱鲆H~+/K~+ ATPase 除了在胃中大量表达之外, 在食道中的表达量也很高。结合组织学观察,作者认为, 大菱鲆H~+/K~+ ATPase 在食道中大量表达是因为在发育上食道是胃的前体, 因此保留了分泌H~+/K~+ ATPase 的能力。同时通过整体原位杂交试验表明: 大菱鲆H~+/K~+ ATPase 会首先在食道的末端和胃的贲门处表达。本研究为进一步了解海水鱼类的消化机制提供了理论基础。
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