鳜免疫球蛋白轻链基因在大肠杆菌中的表达
通过RT-PCR技术从鳜(Siniperca chuatsi)头贤总RNA中获得了免疫球蛋白轻链cDNA,克隆到pGEM-T载体上并测序。测序的2个克隆其可变区cDNA序列相同率为97.3%,属于鳜的同一个轻链可变区基因家族,其变异主要存在于互补性决定区。根据鳜与其他辐鳍鱼类轻链氨基酸序列的多重对准,鳜同鲑(Salmo salar)的可变区的相似性最高(65.7%),而在恒定区,鳜同花狼Wei(Anarhichas minor)的相似性最高(96.3%),都存在特有的连续的丝氨酸残基;鳜同虹鳟(Oncorhynchus mykiss)L1型(62.1%)和斑点叉尾Hui(Ictalurus p...
Main Authors: | , |
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Format: | Report |
Language: | English |
Published: |
2002
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Subjects: | |
Online Access: | http://ir.ihb.ac.cn/handle/342005/41747 |
Summary: | 通过RT-PCR技术从鳜(Siniperca chuatsi)头贤总RNA中获得了免疫球蛋白轻链cDNA,克隆到pGEM-T载体上并测序。测序的2个克隆其可变区cDNA序列相同率为97.3%,属于鳜的同一个轻链可变区基因家族,其变异主要存在于互补性决定区。根据鳜与其他辐鳍鱼类轻链氨基酸序列的多重对准,鳜同鲑(Salmo salar)的可变区的相似性最高(65.7%),而在恒定区,鳜同花狼Wei(Anarhichas minor)的相似性最高(96.3%),都存在特有的连续的丝氨酸残基;鳜同虹鳟(Oncorhynchus mykiss)L1型(62.1%)和斑点叉尾Hui(Ictalurus punctatus)G型(57.2%)轻链也有较高的相似性,将鳜轻链基因分别克隆到原核表达载体pET-28a(+)和pExSecl上,在大肠杆菌BL21(DE3)中以包涵体形式得到高效表达。另外,结合鳜轻链基因序列及其表达产物的分析结果,推断鳜也有两类轻链。 |
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