鳜免疫球蛋白轻链基因在大肠杆菌中的表达

通过RT－PCR技术从鳜（Siniperca chuatsi)头贤总RNA中获得了免疫球蛋白轻链cDNA，克隆到pGEM-T载体上并测序。测序的2个克隆其可变区cDNA序列相同率为97．3％，属于鳜的同一个轻链可变区基因家族，其变异主要存在于互补性决定区。根据鳜与其他辐鳍鱼类轻链氨基酸序列的多重对准，鳜同鲑（Salmo salar)的可变区的相似性最高（65．7％），而在恒定区，鳜同花狼Wei（Anarhichas minor)的相似性最高（96．3％），都存在特有的连续的丝氨酸残基；鳜同虹鳟（Oncorhynchus mykiss)L1型（62．1％）和斑点叉尾Hui(Ictalurus p...

Full description

Bibliographic Details
Main Authors: 张永安, 聂品
Format: Report
Language:English
Published: 2002
Subjects:
大肠杆菌
鳜
免疫球蛋白
轻链
原核表达质粒
基因表达
基因序列分析
体液免疫系统
Salmo salar
Online Access:http://ir.ihb.ac.cn/handle/342005/41747
Description
Summary:通过RT－PCR技术从鳜（Siniperca chuatsi)头贤总RNA中获得了免疫球蛋白轻链cDNA，克隆到pGEM-T载体上并测序。测序的2个克隆其可变区cDNA序列相同率为97．3％，属于鳜的同一个轻链可变区基因家族，其变异主要存在于互补性决定区。根据鳜与其他辐鳍鱼类轻链氨基酸序列的多重对准，鳜同鲑（Salmo salar)的可变区的相似性最高（65．7％），而在恒定区，鳜同花狼Wei（Anarhichas minor)的相似性最高（96．3％），都存在特有的连续的丝氨酸残基；鳜同虹鳟（Oncorhynchus mykiss)L1型（62．1％）和斑点叉尾Hui(Ictalurus punctatus)G型（57．2％）轻链也有较高的相似性，将鳜轻链基因分别克隆到原核表达载体pET-28a(+)和pExSecl上，在大肠杆菌BL21（DE3）中以包涵体形式得到高效表达。另外，结合鳜轻链基因序列及其表达产物的分析结果，推断鳜也有两类轻链。

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