Recherche et identification de bactéries pathogènes au sein d'une écloserie nurserie d'huître creuse, Crassostrea gigas, en relation avec la mortalité estivale du naissain

Summer mortality has been observed on oyster spat Crassostrea gigas since 1991 on french coasts. In our study, we deseribed symptoms observed during the mortality, especially adductor muscle weakness and we isolated strains on Zobell medium and TCBS from moribund spat. Strains isolated during a high...

Full description

Bibliographic Details
Main Author: Waechter, Magali
Format: Doctoral or Postdoctoral Thesis
Language:French
Published: Université de La Rochelle 2001
Subjects:
Online Access:https://archimer.ifremer.fr/doc/00211/32226/30682.pdf
https://archimer.ifremer.fr/doc/00211/32226/
Description
Summary:Summer mortality has been observed on oyster spat Crassostrea gigas since 1991 on french coasts. In our study, we deseribed symptoms observed during the mortality, especially adductor muscle weakness and we isolated strains on Zobell medium and TCBS from moribund spat. Strains isolated during a high mortality (60 %) were selected by experimental pathology on spat. Inoculation by bath led us to select a pathogenic strain (TNEMF6) for oyster spat. Phenotypic identification, phylogenetic study on 16S rDNA and quantitative DNA/DNA hybridisation showed that this strain belongs to Vibrio splendidus biovar II. Phenotyping and ribotyping with strains isolated during the study showed that only TNNIII7 and TNMB5 are similar to the pathogenic strain TNEMF6. Quantitative DNA/DNA hybridisation showed that only TNNIII7 belongs to the same specie than TNEMF6. Difficulty to isolate these strains of Vibrio splendidus II suggested that they may be located out of the tissues. A pathogenic effect with proteolytie exotoxins is suspected related to the weakness of the adductor muscle observed on moribund oyster spat. Then we project to search for detection probes specific to Vibrio splendidus biovar II and pathogenic strains of this specie Depuis 1991 , des épisodes de mortalité estivale de naissain d'huître creuse, Crassostrea gigas, sont observés sur le littoral français. Au cours de notre étude, nous avons décrit des signes observés en relation avec la mortalité, notamment une faiblesse du muscle adducteur et nous avons isolé des souches bactériennes sur milieux de Zobell et TCBS à partir de naissain moribond. Certaines souches isolées au cours d'un épisode particulièrement fort (60 %) sur notre site d' étude ont fait l'objet d'une sélection en pathologie expérimentale. L' inoculation effectuée par balnéation a permis de sélectionner une souche bactérienne (TNEMF6) pathogène pour le naissain d'huître creuse. L' identification phénotypique, l'étude phylogénétique à partir des 16S rDNA et l'hybridation quantitative ADN/ADN montrent que cette souche TNEMF6 appartient à l'espèce Vibrio splendidus biovar II. Le typage à partir des caractères phénotypiques et le ribotypage avec des souches bactériennes isolées au cours de l' étude montre que 2 souches isolées d'épisodes de mortalité de naissain, TNNIII7 et TNMB5, présentent des similarités avec la souche TNEMF6. L'hybridation quantitative ADN/ADN montre que seule la souche TNNIII7 appartient à la même espèce que TNEMF6. La difficulté rencontrée lors de l' isolement de ces souches de Vibrio splendidus biovar II sur le naissain suggère que celles-ci se localisent vraisemblablement en dehors des tissus de l'hôte. Une action à distance avec l'intervention d'exotoxines protéolytiques est suspectée, celles-ci pouvant être à l'origine de la faiblesse du muscle adducteur observé sur le naissain moribond. Les perspectives de cette étude sont la recherche d'outils de détection spécifiques de Vibrio splendidus biovar II et des souches pathogènes de cette espèce.