| Summary: | RESULTADOS OBTENIDOS: Para cada uno de los objetivos específicos, describa o resuma los resultados. Relacione las publicaciones y /o manuscritos enviados a publicación con los objetivos específicos. En la sección Anexos incluya información adicional que considere pertinente para efectos de la evaluación. La extensión máxima de esta sección es de 5 páginas (letra tamaño 10, Arial o Verdana). Objetivos específicos • Evaluar in vitro el efecto de doxiciclina sobre la proliferación frente a hipoxia de células PASMC humanas y su dependencia de la UPRmt. • Evaluar in vitro el efecto de doxiciclina sobre los cambios del metabolismo celular frente a hipoxia en células PASMC humanas y su dependencia de la UPRmt. Resultados: Objetivo 1 Nuestros primeros resultados mostraron que el tratamiento con doxiciclina 60 µg/mL aumenta la expresión de diversos genes marcadores de UPRmt en PASMC humanas (hPASMC), siendo el tiempo más consistente el de 48 h de estímulo (Figura 1). Por otra parte, la hipoxia por sí sola no tuvo un efecto claro sobre la inducción de la UPRmt (Figura 2). Figura 1. Doxiciclina aumenta la expresión de genes marcadores de UPRmt en hPASMC. Las células se trataron con doxiciclina 60 µg/mL durante el tiempo indicado. Análisis comparativo de los niveles de mRNA de distintos marcadores de UPRmt versus el gen constitutivo HPRT, normalizando en cada caso contra el control. (A) CHOP, (B) C/EBPβ, (C) ATF4, (D) mtHsp60, (E) ClpP, (F) LONP1. ns, no significativo; * p < 0,05 versus control (n=3-6). Promedio ± SEM; Análisis mediante ANOVA de una vía seguido del test de comparaciones múltiples de Holm-Sidak. Figura 2. Efecto de la hipoxia sobre la expresión de genes marcadores de UPRmt en hPASMC. Las células se sometieron a hipoxia durante el tiempo indicado. Análisis comparativo de los niveles de mRNA de distintos marcadores de UPRmt versus el gen constitutivo HPRT, normalizando en cada caso contra el control. (A) CHOP, (B) C/EBPβ, (C) ATF4, (D) mtHsp60, (E) ClpP, (F) LONP1. ns, no significativo; * p < 0,05 ...
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