Presence of apoptotic bodies in the human ejaculate: effects of exposure to persistent organochlorine pollutants

• Main Author: Manes, Sabrina
• Other Authors: Bizzaro, Davide
• Format: Doctoral or Postdoctoral Thesis
• Language: English
• Published: Università Politecnica delle Marche 2012
• Subjects: Settore BIO/18 - Genetica; Basso; Hanno; Messo; Groenlandia
• Online Access: http://hdl.handle.net/11566/242082; http://openarchive.univpm.it/jspui/handle/123456789/379

La presenza di corpi apoptotici (chiamati anche M540 bodies a causa della loro colorazione con la merocianina 540) nell’eiaculato è stata ampiamente dimostrata. Tali M540 bodies sono elementi eterogenei sia per dimensioni che per densità e sono caratterizzati dalla scarsità di materiale cromatinico e dall’espressione di markers apoptotici, inclusi il recettore Fas e la frammentazione del DNA; sono maggiormente riscontrabili nell’eiaculato di uomini con scarsa qualità del liquido seminale. La presenza di M540 bodies nell’eiaculato ha sia implicazioni cliniche che metodologiche. Infatti, da un lato la loro presenza può essere considerata un segno di apoptosi patologica/eccessiva negli organi riproduttivi maschili; dall’altro, poiché tali corpi apoptotici mostrano dimensioni e densità simili a quelli della testa degli spermatozoi, possono rappresentare un fattore confondente negli studi di spermatozoi in citofluorimetria. Per questa ragione, abbiamo messo a punto una strategia di analisi off-line in modo da poter distinguere tali corpi apoptotici in base all’amplificazione del segnale di fluorescenza relativo alla colorazione nucleare; infatti gli M540 bodies hanno un basso contenuto di DNA, inferiore a quello degli spermatozoi. Perciò l’analisi off-line permette di discriminare i corpi apoptotici dai gameti maschili in base alle dimensioni e al contenuto di DNA, evitando in tal modo dati equivoci. Un ulteriore scopo di tale lavoro di tesi è stato quello di analizzare la presenza dei corpi apoptotici nei campioni seminali di uomini fertili appartenenti a quattro differenti popolazioni (da Groenlandia, Svezia, Polonia e Ucraina) ed in particolar modo di investigare se esistesse una correlazione tra la presenza di M540 bodies e l’esposizione ad organoclorurati biopersistenti, che possono agire come interferenti endocrini. In particolare sono stati presi in considerazione il CB-153 per la sua stretta correlazione con la concentrazione dei PCB totali, e il DDE (il principale metabolita del DDT) in quanto buon ...