Fast, safe and high-throughput Real-Time PCR protocol for molecular sex identification in Salmo salar, applicable to historic scale collections

• Main Authors: Besnard, Anne-Laure, Meslier, Lisa, Jousseaume, Thibaut, Nevoux, Marie, Marchand, Frederic, Launey, Sophie
• Other Authors: Dynamique et durabilité des écosystèmes : de la source à l’océan (DECOD), Institut Français de Recherche pour l'Exploitation de la Mer (IFREMER)-Institut National de Recherche pour l’Agriculture, l’Alimentation et l’Environnement (INRAE)-Institut national d'enseignement supérieur pour l'agriculture, l'alimentation et l'environnement (Institut Agro), Pôle OFB-INRAE-Institut Agro-UPPA pour la gestion des migrateurs amphihalins dans leur environnement (MIAME), Université de Pau et des Pays de l'Adour (UPPA)-Institut National de Recherche pour l’Agriculture, l’Alimentation et l’Environnement (INRAE)-Office français de la biodiversité (OFB)-Institut Agro Rennes Angers, Institut national d'enseignement supérieur pour l'agriculture, l'alimentation et l'environnement (Institut Agro)-Institut national d'enseignement supérieur pour l'agriculture, l'alimentation et l'environnement (Institut Agro), Unité Expérimentale d'Ecologie et d'Ecotoxicologie Aquatique - U3E (Rennes, France) (U3E ), Institut National de Recherche pour l’Agriculture, l’Alimentation et l’Environnement (INRAE)
• Format: Report
• Language: English
• Published: HAL CCSD 2023
• Subjects: [SDE]Environmental Sciences; Atlantic salmon; Salmo salar
• Online Access: https://hal.inrae.fr/hal-04197404; https://doi.org/10.1101/2023.09.05.556299

Conservation and management of wild species needs a detailed understanding of their population structure and dynamics. For instance, there are increasing evidence for sex-specific life history trajectories, even in species with limited morphological sexual dimorphism. In these species, identifying the sex of individuals in some or all life stages is a methodological challenge, which requires the development of new tools. Building on recent findings in molecular biology, we developed a new protocol for sex identification in Atlantic salmon (Salmo salar), aiming at the following criteria: accurate sex identification, fast diagnostic, applicable to large sample size, applicable to degraded DNA extracted from e.g. fish scales, and safe for the operator by limiting health and safety hazard. The protocol relies on multiplex Real-Time PCR using a set of specific primers. We tested its accuracy on a test set of 90 DNA samples from individuals of known morphological sex, and demonstrated its applicability on a large DNA sample from 384 individuals of unknown sex.