Purificação, características cinéticas e isenzimas da lactato desidrogenase (L-Lactato: NAD+ oxidoredutase, E.C.1.1.1.27) do músculo epaxial de curimbata, Prochilodus scrofa, Steindachner, 1881, e de Notothenia neglecta (Pisces, Teleostei)

• Main Author: Carvalho, Cleoni dos Santos
• Other Authors: Rubens, Rosa, Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias
• Format: Thesis
• Language: Portuguese
• Published: 1997
• Subjects: 578.085.23:597(26)(211); Peixe marinho - Histoquimica - Regiões polares; Teses; Antártica
• Online Access: http://hdl.handle.net/1884/37757

Orientador: Rubens Rosa Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Curso de Pós-Graduação em Ciencias Veterinarias. Resumo: Foi realizado estudo comparativo de purificação, propriedades cinéticas e distribuição tecidual de lactato desidrogenase (L-Lactato : NAD+ oxidorredutase, E.C. 1.1.1.27) de músculo epaxial de peixes, Prochilodns scropha, uma espécie tropical e Notothenia neglecta, uma espécie antártica. A purificação da LDH foi levada a efeito em cromatografia por afinidade de oxamatoagarose, tendo sido possível obter valores satisfatórios de purificação. Para o estudo cinético a LDH foi purificada por precipitação com sulfato de amónio a 70%, centrifugada e dialisada. Em LDH de ambas as espécies estudou-se o efeito da concentração hidrogeniónica, a LDH apresenta pH ótimo em torno de 6,5 a 7,5 e 6,6 a 7,0, para P. scropha e N. neglecta, respectivamente. A energia de ativação foi de 7.591 e 6.567 cal/mol para P. scropha e N. neglecta, respectivamente. O estudo do efeito da temperatura sobre o KN! da LDH para o piruvato foram os seguintes: para LDH de P. scropha : 0,09mM, 0,13mM e 0,13mM de piruvato a 10°C, 20°C e 30°C, respectivamente; para LDH de N. neglecta. os valores de Km em diferentes temperaturas foram :0,24mM, 0,3lmM e 0,33mM de piruvato a 10°C, 20°C e 30°C, respectivamente. O efeito do pH nos valores de Km de ambas as preparações de LDH foram as seguintes: para LDH de P. scropha. 0,048mM, 0,046mM e 0,144mM de piruvato em pH 6,0, 7,0 e 8,0, respectivamente; para LDH de N. neglecta: os valores de Km nos diferentes pH foram os seguintes: 0,044mM, 0,153mM e 0,277mM de piruvato em pH 6,0, 7,0 e 8,0, respectivamente; Ambas as preparações de LDH foram sensíveis quando incubadas a altas temperaturas, incubação por 30 minutos a 50°C causou acentuada inativação da LDH de ambas as fontes. Com relação aos inibidores, o oxalato atua como inibidor não competitivo tanto para LDH de P. scropha como para LDH de N. neglecta. Por outro lado, oxamato aparenta ser inibidor incompetitivo para ambas as ...