| Summary: | Orientador: Rubens Rosa Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Curso de Pós-Graduação em Ciencias Veterinarias. Resumo: Foi realizado estudo comparativo de purificação, propriedades cinéticas e distribuição tecidual de lactato desidrogenase (L-Lactato : NAD+ oxidorredutase, E.C. 1.1.1.27) de músculo epaxial de peixes, Prochilodns scropha, uma espécie tropical e Notothenia neglecta, uma espécie antártica. A purificação da LDH foi levada a efeito em cromatografia por afinidade de oxamatoagarose, tendo sido possível obter valores satisfatórios de purificação. Para o estudo cinético a LDH foi purificada por precipitação com sulfato de amónio a 70%, centrifugada e dialisada. Em LDH de ambas as espécies estudou-se o efeito da concentração hidrogeniónica, a LDH apresenta pH ótimo em torno de 6,5 a 7,5 e 6,6 a 7,0, para P. scropha e N. neglecta, respectivamente. A energia de ativação foi de 7.591 e 6.567 cal/mol para P. scropha e N. neglecta, respectivamente. O estudo do efeito da temperatura sobre o KN! da LDH para o piruvato foram os seguintes: para LDH de P. scropha : 0,09mM, 0,13mM e 0,13mM de piruvato a 10°C, 20°C e 30°C, respectivamente; para LDH de N. neglecta. os valores de Km em diferentes temperaturas foram :0,24mM, 0,3lmM e 0,33mM de piruvato a 10°C, 20°C e 30°C, respectivamente. O efeito do pH nos valores de Km de ambas as preparações de LDH foram as seguintes: para LDH de P. scropha. 0,048mM, 0,046mM e 0,144mM de piruvato em pH 6,0, 7,0 e 8,0, respectivamente; para LDH de N. neglecta: os valores de Km nos diferentes pH foram os seguintes: 0,044mM, 0,153mM e 0,277mM de piruvato em pH 6,0, 7,0 e 8,0, respectivamente; Ambas as preparações de LDH foram sensíveis quando incubadas a altas temperaturas, incubação por 30 minutos a 50°C causou acentuada inativação da LDH de ambas as fontes. Com relação aos inibidores, o oxalato atua como inibidor não competitivo tanto para LDH de P. scropha como para LDH de N. neglecta. Por outro lado, oxamato aparenta ser inibidor incompetitivo para ambas as ...
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