Expressão genica diferencial em ostras Crassostrea gigas expostas a esgoto doméstico

• Main Author: Medeiros, Igor Dias
• Other Authors: Bainy, Afonso Celso Dias, Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular
• Format: Thesis
• Language: Portuguese
• Published: 2008
• Subjects: Teses; Molusco; Marcadores biologicos; Monitoramento ambiental; Citologia e biologia celular; Biologia molecular; Sob’; Crassostrea gigas
• Online Access: http://hdl.handle.net/1884/18643

Orientador : Afonso Celso Dias Bainy Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular. Defesa: Curitiba, 25/09/2008 Inclui bibliografia e anexos O lançamento de esgoto doméstico em águas superficiais é a principal causa de poluição dos ecossistemas aquáticos ao redor do mundo. O esgoto contém contaminantes diversos como produtos de higiene pessoal, limpeza doméstica, medicamentos humanos e veterinários, óleos e graxas, químicos diversos, além de microorganismos patogênicos e nutrientes em excesso. O contato destes compostos com a biota provoca alterações causando dano e ativando os mecanismos de defesa. A análise da expressão de diferentes genes simultaneamente em um organismo exposto à presença de um contaminante pode auxiliar o entendimento dos mecanismos de toxicidade e defesa biológica, além de contribuir como biomarcador de contaminação em programas de monitoramento ambiental. No presente trabalho, após um período de 10 dias de aclimatação, ostras adultas da espécie Crassostrea gigas (n=10) foram expostas a 33% de esgoto doméstico não tratado por 48h, em aquários de 45L sob condições controladas. Através da técnica de hibridização subtrativa supressiva a expressão diferencial de genes em pool de brânquias de cinco ostras macho foi investigada, sendo obtidos inicialmente 61 clones, dos quais 15 foram identificados. Cinco genes associados a mecanismos de biotransformação de xenobióticos foram escolhidos para confirmação da indução da expressão por RT-PCR semi-quantitativo, normalizado pela expressão do gene da Actina. Esses genes são responsáveis por reações de biotransformação de fase I (CYP356A1), fase II (GSTO), fase III (MDR), transporte de ácidos graxos e compostos hidrofóbicos (FABP) e síntese do grupo heme (ALAS). Todos os genes apresentaram maiores valores de expressão (1,9, 3,3, 3,3, 43,6 e 2,9x para CYP356A1, GSTO, MDR, FABP e ALAS, respectivamente) nas ostras expostas ao esgoto quando comparadas ao grupo ...