An Atlantic cod (Gadus morhua L.) pituitary model system for reproductive and reprotoxic testing in vitro
Due to factors such as overfishing, climate changes and pollution, most fish stocks are in decline. This is also the case for the commercially important marine species, Atlantic cod (Gadus morhua). As a result, the last few decades there has been growing interest to cultivate this species. However,...
Main Author: | |
---|---|
Other Authors: | , , , |
Format: | Doctoral or Postdoctoral Thesis |
Language: | English |
Published: |
Norwegian University of Life Sciences, Ås
2021
|
Subjects: | |
Online Access: | https://hdl.handle.net/11250/2768040 |
id |
ftunivmob:oai:nmbu.brage.unit.no:11250/2768040 |
---|---|
record_format |
openpolar |
institution |
Open Polar |
collection |
Open archive Norwegian University of Life Sciences: Brage NMBU |
op_collection_id |
ftunivmob |
language |
English |
topic |
Teleost Reproduction Atlantic cod Pituitary Steroid feedback Stress Steroids Cortisol Endocrine disruption Bisphenol A Tetrabromobisphenol A Androgen Estrogen Gnrh receptors Cell viability Follicle-stimulating hormone Luteinizing hormone |
spellingShingle |
Teleost Reproduction Atlantic cod Pituitary Steroid feedback Stress Steroids Cortisol Endocrine disruption Bisphenol A Tetrabromobisphenol A Androgen Estrogen Gnrh receptors Cell viability Follicle-stimulating hormone Luteinizing hormone von Krogh, Kristine An Atlantic cod (Gadus morhua L.) pituitary model system for reproductive and reprotoxic testing in vitro |
topic_facet |
Teleost Reproduction Atlantic cod Pituitary Steroid feedback Stress Steroids Cortisol Endocrine disruption Bisphenol A Tetrabromobisphenol A Androgen Estrogen Gnrh receptors Cell viability Follicle-stimulating hormone Luteinizing hormone |
description |
Due to factors such as overfishing, climate changes and pollution, most fish stocks are in decline. This is also the case for the commercially important marine species, Atlantic cod (Gadus morhua). As a result, the last few decades there has been growing interest to cultivate this species. However, a major set-back in cod aquaculture is precocious sexual maturity in farmed fish, leading to decreased flesh quality and quantity, higher susceptibility to diseases and spread of gametes from the net-pens to the surrounding environment. Sexual maturation in fish, as in other vertebrates, is regulated through the brain-pituitary-gonadal (BPG) axis. The brain produces gonadotropin releasing hormone (Gnrh) which stimulate synthesis and release of follicle-stimulating hormone (Fsh) and luteinizing hormone (Lh) from gonadotrope cells in the pituitary. Fsh and Lh travel through the blood to the gonads, where they initiate gametogenesis and sex steroid production. The BPG axis is modulated through external factors such as temperature and light, and internal factors such as nutritional status. In recent years, endocrine disruptive (ED) properties have been demonstrated in many commercial compounds released into the environment, some of which have the capacity to affect fish development and reproduction. The exact mechanisms behind many of the above-mentioned regulating factors are largely unknown. Therefore, the primary aim of this thesis was to investigate further the reproductive-related regulation of the Atlantic cod pituitary. In order to do so, a primary culture model system using dispersed pituitary cells was developed. The system was optimized to mimic cod physiology and the natural environment, leading to stable, healthy, and physiologically relevant cultures. Once established, the culture system was subsequently used to investigate potential effects from sex steroids, the stress hormone cortisol, and the suspected ED contaminants, bisphenol A (BPA) and tetrabromobisphenol A (TBBPA), on pituitary gene expression and cell viability. By using cod donors at different stages of sexual maturity, potential maturity-dependent effects were also assessed. The results demonstrate that pituitary cultures are receptive to direct mechanisms from both endogenous and exogenous factors and that the Atlantic cod pituitary is a site for direct influence from sex steroids, stress, and pollutants. Dependent on dose and stage of sexual maturity, all tested substances were able to affect cell viability and gene expression and could potentially modulate cod reproductive function. For future work, this model system can be a useful tool for investigating physiological mechanisms in the pituitary and for screening of potential effects from environmental contaminants. Grunnet blant annet overfiske, klimaendringer og forurensing er mange av verdens fiskebestander synkende. Dette gjelder også torsk (Gadus morhua), en kommersielt viktig saltvannsart. De lave bestandene har initiert kultivering av torsk, men næringen har møtt flere store problemer, blant annet at oppdrettstorsken blir kjønnsmoden tidligere enn normalt. Tidlig kjønnsmodning kan føre til nedsatt kjøttkvalitet og - kvantitet, høyere mottagelighet for sykdom, samt genetisk forurensing til miljøet via spredning av gameter fra merdene. Hos fisk, som hos andre virveldyr, styres kjønnsmodningen gjennom hjerne-hypofyse-gonadeaksen (BPG-aksen). Hjernen produserer gonadotropin-frigjørende hormon (Gnrh) som stimulerer syntese og frigjøring av follikkelstimulerende hormon (Fsh) og luteiniserende hormon (Lh) fra gonadotrope celler i hypofysen. Fsh og Lh blir fraktet via blodbanen til gonadene, der de igangsetter gametogenese og produksjon av kjønnssteroider. BPG-aksen blir regulert via eksterne faktorer som temperatur og lys, samt interne faktorer som næringstilstand. De siste årene har det blitt påvist endokrinforstyrrende effekter fra flere kommersielle stoffer som slippes ut i miljøet. Noen av disse har også kapasitet til å påvirke fiskers reproduksjonsevne. De presise mekanismene bak flere av de overnevnte reguleringsfaktorene er ennå ikke kartlagte. Det primære målet for denne avhandlingen var å undersøke reproduksjons-relaterte reguleringer av torskehypofysen. For å kunne studere dette nærmere utviklet vi et modellsystem bestående av separerte hypofyseceller i primærkultur. Systemet ble optimalisert i henhold til torskens fysiologi og naturlige miljø, noe som førte til stabile, friske og fysiologisk relevante kulturer. De optimaliserte kulturene ble siden benyttet til å undersøke mulige effekter fra kjønnssteroider, stresshormonet kortisol og de antatt endokrinforstyrrende stoffene bisfenol A (BPA) og tetrabromobisfenol A (TBBPA) på genuttrykk og celleviabilitet i hypofysen. Ved å ta prøver fra torsk i ulike kjønnsmodningsstadier kunne vi også vurdere mulige stadiumseffekter. Resultatene viser at hypofysekulturer kan benyttes til å studere mekanismer forårsaket av både endogene og eksogene faktorer, og at torskehypofysen kan påvirkes direkte av kjønnssteroider, stress og forurensing. Avhengig av dose og modningsstadium påvirket alle substansene både celleviabiliteten og genuttrykket og kan dermed modulere torskens reproduktive funksjoner. For framtidig arbeid kan dette modellsystemet være et nyttig verktøy for å undersøke fysiologiske mekanismer i hypofysen og til å screene for mulige effekter fra miljøforurensende stoffer. |
author2 |
Weltzien, Finn-Arne Haug, Trude Marie Ropstad, Erik Mayer, Ian |
format |
Doctoral or Postdoctoral Thesis |
author |
von Krogh, Kristine |
author_facet |
von Krogh, Kristine |
author_sort |
von Krogh, Kristine |
title |
An Atlantic cod (Gadus morhua L.) pituitary model system for reproductive and reprotoxic testing in vitro |
title_short |
An Atlantic cod (Gadus morhua L.) pituitary model system for reproductive and reprotoxic testing in vitro |
title_full |
An Atlantic cod (Gadus morhua L.) pituitary model system for reproductive and reprotoxic testing in vitro |
title_fullStr |
An Atlantic cod (Gadus morhua L.) pituitary model system for reproductive and reprotoxic testing in vitro |
title_full_unstemmed |
An Atlantic cod (Gadus morhua L.) pituitary model system for reproductive and reprotoxic testing in vitro |
title_sort |
atlantic cod (gadus morhua l.) pituitary model system for reproductive and reprotoxic testing in vitro |
publisher |
Norwegian University of Life Sciences, Ås |
publishDate |
2021 |
url |
https://hdl.handle.net/11250/2768040 |
long_lat |
ENVELOPE(9.783,9.783,63.250,63.250) ENVELOPE(14.465,14.465,68.663,68.663) |
geographic |
Bak Føre |
geographic_facet |
Bak Føre |
genre |
atlantic cod Gadus morhua |
genre_facet |
atlantic cod Gadus morhua |
op_relation |
PhD Thesis;2021:14 Norges forskningsråd: 184851 191825 urn:isbn:978-82-575-1722-9 urn:issn:1894-6402 https://hdl.handle.net/11250/2768040 |
op_rights |
Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 Internasjonal http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/deed.no |
op_rightsnorm |
CC-BY-NC-ND |
_version_ |
1766357836142477312 |
spelling |
ftunivmob:oai:nmbu.brage.unit.no:11250/2768040 2023-05-15T15:27:24+02:00 An Atlantic cod (Gadus morhua L.) pituitary model system for reproductive and reprotoxic testing in vitro Et modellsystem for testing av reproduktive og reprotoksikologiske effekter på torskehypofysen in vitro von Krogh, Kristine Weltzien, Finn-Arne Haug, Trude Marie Ropstad, Erik Mayer, Ian 2021 application/pdf https://hdl.handle.net/11250/2768040 eng eng Norwegian University of Life Sciences, Ås PhD Thesis;2021:14 Norges forskningsråd: 184851 191825 urn:isbn:978-82-575-1722-9 urn:issn:1894-6402 https://hdl.handle.net/11250/2768040 Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 Internasjonal http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/deed.no CC-BY-NC-ND Teleost Reproduction Atlantic cod Pituitary Steroid feedback Stress Steroids Cortisol Endocrine disruption Bisphenol A Tetrabromobisphenol A Androgen Estrogen Gnrh receptors Cell viability Follicle-stimulating hormone Luteinizing hormone Doctoral thesis 2021 ftunivmob 2021-09-23T20:16:23Z Due to factors such as overfishing, climate changes and pollution, most fish stocks are in decline. This is also the case for the commercially important marine species, Atlantic cod (Gadus morhua). As a result, the last few decades there has been growing interest to cultivate this species. However, a major set-back in cod aquaculture is precocious sexual maturity in farmed fish, leading to decreased flesh quality and quantity, higher susceptibility to diseases and spread of gametes from the net-pens to the surrounding environment. Sexual maturation in fish, as in other vertebrates, is regulated through the brain-pituitary-gonadal (BPG) axis. The brain produces gonadotropin releasing hormone (Gnrh) which stimulate synthesis and release of follicle-stimulating hormone (Fsh) and luteinizing hormone (Lh) from gonadotrope cells in the pituitary. Fsh and Lh travel through the blood to the gonads, where they initiate gametogenesis and sex steroid production. The BPG axis is modulated through external factors such as temperature and light, and internal factors such as nutritional status. In recent years, endocrine disruptive (ED) properties have been demonstrated in many commercial compounds released into the environment, some of which have the capacity to affect fish development and reproduction. The exact mechanisms behind many of the above-mentioned regulating factors are largely unknown. Therefore, the primary aim of this thesis was to investigate further the reproductive-related regulation of the Atlantic cod pituitary. In order to do so, a primary culture model system using dispersed pituitary cells was developed. The system was optimized to mimic cod physiology and the natural environment, leading to stable, healthy, and physiologically relevant cultures. Once established, the culture system was subsequently used to investigate potential effects from sex steroids, the stress hormone cortisol, and the suspected ED contaminants, bisphenol A (BPA) and tetrabromobisphenol A (TBBPA), on pituitary gene expression and cell viability. By using cod donors at different stages of sexual maturity, potential maturity-dependent effects were also assessed. The results demonstrate that pituitary cultures are receptive to direct mechanisms from both endogenous and exogenous factors and that the Atlantic cod pituitary is a site for direct influence from sex steroids, stress, and pollutants. Dependent on dose and stage of sexual maturity, all tested substances were able to affect cell viability and gene expression and could potentially modulate cod reproductive function. For future work, this model system can be a useful tool for investigating physiological mechanisms in the pituitary and for screening of potential effects from environmental contaminants. Grunnet blant annet overfiske, klimaendringer og forurensing er mange av verdens fiskebestander synkende. Dette gjelder også torsk (Gadus morhua), en kommersielt viktig saltvannsart. De lave bestandene har initiert kultivering av torsk, men næringen har møtt flere store problemer, blant annet at oppdrettstorsken blir kjønnsmoden tidligere enn normalt. Tidlig kjønnsmodning kan føre til nedsatt kjøttkvalitet og - kvantitet, høyere mottagelighet for sykdom, samt genetisk forurensing til miljøet via spredning av gameter fra merdene. Hos fisk, som hos andre virveldyr, styres kjønnsmodningen gjennom hjerne-hypofyse-gonadeaksen (BPG-aksen). Hjernen produserer gonadotropin-frigjørende hormon (Gnrh) som stimulerer syntese og frigjøring av follikkelstimulerende hormon (Fsh) og luteiniserende hormon (Lh) fra gonadotrope celler i hypofysen. Fsh og Lh blir fraktet via blodbanen til gonadene, der de igangsetter gametogenese og produksjon av kjønnssteroider. BPG-aksen blir regulert via eksterne faktorer som temperatur og lys, samt interne faktorer som næringstilstand. De siste årene har det blitt påvist endokrinforstyrrende effekter fra flere kommersielle stoffer som slippes ut i miljøet. Noen av disse har også kapasitet til å påvirke fiskers reproduksjonsevne. De presise mekanismene bak flere av de overnevnte reguleringsfaktorene er ennå ikke kartlagte. Det primære målet for denne avhandlingen var å undersøke reproduksjons-relaterte reguleringer av torskehypofysen. For å kunne studere dette nærmere utviklet vi et modellsystem bestående av separerte hypofyseceller i primærkultur. Systemet ble optimalisert i henhold til torskens fysiologi og naturlige miljø, noe som førte til stabile, friske og fysiologisk relevante kulturer. De optimaliserte kulturene ble siden benyttet til å undersøke mulige effekter fra kjønnssteroider, stresshormonet kortisol og de antatt endokrinforstyrrende stoffene bisfenol A (BPA) og tetrabromobisfenol A (TBBPA) på genuttrykk og celleviabilitet i hypofysen. Ved å ta prøver fra torsk i ulike kjønnsmodningsstadier kunne vi også vurdere mulige stadiumseffekter. Resultatene viser at hypofysekulturer kan benyttes til å studere mekanismer forårsaket av både endogene og eksogene faktorer, og at torskehypofysen kan påvirkes direkte av kjønnssteroider, stress og forurensing. Avhengig av dose og modningsstadium påvirket alle substansene både celleviabiliteten og genuttrykket og kan dermed modulere torskens reproduktive funksjoner. For framtidig arbeid kan dette modellsystemet være et nyttig verktøy for å undersøke fysiologiske mekanismer i hypofysen og til å screene for mulige effekter fra miljøforurensende stoffer. Doctoral or Postdoctoral Thesis atlantic cod Gadus morhua Open archive Norwegian University of Life Sciences: Brage NMBU Bak ENVELOPE(9.783,9.783,63.250,63.250) Føre ENVELOPE(14.465,14.465,68.663,68.663) |