DIAGNÓSTICO MOLECULAR DE MOLLICUTES EM CAVIDADE ORAL DE ROEDORES E MARSUPIAIS DA ILHA DE ITAMARACÁ, PERNAMBUCO, BRASIL
Introdução: A classe Mollicutes é composta de cinco ordens, seis famílias e 14 gêneros, os quais tem sido diagnósticados em diversas espécies de animais incluindo-se o homem. Tendo essa classe, cinco gêneros de importância veterinária, sendo o gênero Mycoplasma o mais abrangente entre os animais, a...
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Published: |
EDUFAL - Editora da Univeridade Federal de Alagoas
2020
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Diagnóstico Molecular Gambá Rato Micoplasmoses |
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Diagnóstico Molecular Gambá Rato Micoplasmoses Benicio, Manuel Benicio Batista, Sandra Batista Resende, Matheus Resende Wilton, José Wilton Camara, Leucio Camara Aparecido, Rinaldo Aparecido Fernando, Victor Fernando DIAGNÓSTICO MOLECULAR DE MOLLICUTES EM CAVIDADE ORAL DE ROEDORES E MARSUPIAIS DA ILHA DE ITAMARACÁ, PERNAMBUCO, BRASIL |
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Introdução: A classe Mollicutes é composta de cinco ordens, seis famílias e 14 gêneros, os quais tem sido diagnósticados em diversas espécies de animais incluindo-se o homem. Tendo essa classe, cinco gêneros de importância veterinária, sendo o gênero Mycoplasma o mais abrangente entre os animais, a grande maioria desses micro-organismos é encontrada na microbiota oral, tendo espécies que são oportunistas e patogênicas causadoras de doenças, tanto em espécies domésticas quanto em animais silvestres. Objetivo: Diagnosticar molecularmente Mollicutes em cavidade oral de roedores e marsupiais da Ilha de Itamaracá, Pernambuco, Brasil. Método: Para esse estudo foram coletadas amostras de suabes via orofaringe de roedores (Rattus rattus n=4, Oryzomys nigripes n=3, Rattus norvegicus n=2, Cerradomys subflavus n=2 e Oryzomys fornesi n=1) e marsupiais (Didelphis albiventris n=12). Para obtenção das amostras os animais foram capturados com o auxílio de armadilhas Tomahawk e posteriormente sedados. Todas as amostras foram processadas no Laboratório de Doenças Infecciosas da Universidade Federal Rural de Pernambuco, as quais foram aliquotadas em volume de 300µL e submetidas à extração do DNA genômico com o kit comercial “Wizard® Genomic DNA Purification Kit” (Promega, A1125), de acordo com o protocolo do fabricante. Após avaliação da qualidade e quantidade do DNA , as amostras submetidas a PCR com oligonucleotídeos genéricos MGSO (5’-TGC ACC ATC TGT CAC TCT GTT AAC CTC-3’) e GPO3 (5’-GGG AGC AAA QAAG GAT TAG ATA CCC T -3’) para detecção dos gêneros pertencentes à classe Mollicutes. O perfil térmico foi previamente descrito por kuppeveld et al., (1992) que amplificam as regiões conservadas V6 e V7 do gene 16SRNA, específicos para Classe Mollicutes. Como controle positivo utilizou-se o isolado GM12 e como controle negativo água ultrapura. Para realização desse estudo obteve-se autorização do Sistema de Autorização e Informação em Biodiversidade com a licença de número 50.588-1. Resultado: Como resultado, foi obervado que 33,3% (8/24%) das amostras amplificaram os “primers” universais para o gene 16SRNA resultando em um produto de aproximadamente 280 pares de base., sendo consideradas positivas para essa classe Mollicutes. Os marsupiais corresponderam a 75% (D.albiventris n=6) das amostras positivas, seguida dos roedores com 25% (R. rattus n=1; O. nigripes n = 1). 18,7% (3/16) das amostras analisadas molecularmente apresentaram resultados inespecíficos para o gene 16SRNA, pois amplificaram 400pb. Discussão: Neste estudo relatamos pela primeira vez no Nordeste o diagnóstico molecular de bactérias da classe Mollicutes em cavidade oral em roeodores e marsupiais de vida livre, incluindo D.albiventris, R. rattus e O. Nigripes como novos hospedeiros desse patógeno. Apesar desse estudo ter detectado somemente a classe Mollicutes, vale destacar que pesquisas envolvendo roedores selvagens sugerem que estes animais sejam infectados principalmente por micoplasmas hemotrópicos (Sashida et al. (2013). Conclusão: Reodores e marsupiais de pernambuco são parasitados por bactérias da classe Mollicutes. Sendo necessários novos estudos para se compreender a relação parasito-hospedeiro nesses animais. |
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