Nouveaux outils moléculaires pour l'étude des propriétés de Pseudozyma flocculosa
Le champignon Pseudozyma flocculosa a été particulièrement étudié pour son activité de lutte biologique contre le blanc. Par génie génétique, une molécule à activité antifongique, la flocculosine, a été isolée et caractérisée. Suite à ces travaux, l'utilisation des champignons du genre Pseudozy...
Main Author: | |
---|---|
Other Authors: | , |
Format: | Thesis |
Language: | French |
Published: |
Université Laval
2007
|
Subjects: | |
Online Access: | https://hdl.handle.net/20.500.11794/19657 |
id |
fttriple:oai:gotriple.eu:http://hdl.handle.net/20.500.11794/19657 |
---|---|
record_format |
openpolar |
spelling |
fttriple:oai:gotriple.eu:http://hdl.handle.net/20.500.11794/19657 2023-05-15T14:03:03+02:00 Nouveaux outils moléculaires pour l'étude des propriétés de Pseudozyma flocculosa New molecular tools for the investigation of the properties of Pseudozyma flocculosa Neveu, Bertrand Bélanger, Richard R. Belzile, François 2007-01-01 https://hdl.handle.net/20.500.11794/19657 fr fre Université Laval http://hdl.handle.net/20.500.11794/19657 other CorpusUL envir geo Thesis https://vocabularies.coar-repositories.org/resource_types/c_46ec/ 2007 fttriple https://doi.org/20.500.11794/19657 2023-01-22T17:33:12Z Le champignon Pseudozyma flocculosa a été particulièrement étudié pour son activité de lutte biologique contre le blanc. Par génie génétique, une molécule à activité antifongique, la flocculosine, a été isolée et caractérisée. Suite à ces travaux, l'utilisation des champignons du genre Pseudozyma pour la production de protéines recombinantes a présenté un nouvel axe de recherche. Toutefois, la variété des outils moléculaires disponibles pour l'étude des Pseudozyma spp. est limitée aux séquences régulatrices (promoteur, terminateur) du gène HSP70 d'un champignon voisin, Ustilago maydis. Les objectifs de notre recherche étaient donc les suivants : 1) obtenir des séquences promotrices de P. flocculosa; 2) comparer l'activité de ces séquences promotrices avec le promoteur HSP70; et 3) démontrer l'utilité de ces outils moléculaires dans le contexte d'une nouvelle approche d'étude de l'écologie de P. flocculosa. Dans un premier temps, un promoteur spécifique a été ciblé, soit le promoteur du gène d'actine car celui-ci est reconnu comme étant fort et constitutif chez d'autres champignons. En parallèle, un promoteur dont les transcrits étaient parmi les plus abondants dans des conditions de cultures déterminées a été identifié et cloné. Le gène codant pour la glycéraldéhyde 3-phosphate-déshydrogénase (GPD), une enzyme importante du métabolisme carboné de la cellule, a donc pu être cloné et séquencé. Nous avons ainsi obtenu 1133 pb de la séquence promotrice du gène d'actine et 1139 pb du gène GPD de P. flocculosa. Dans un deuxième temps, la comparaison de la force de ces deux promoteurs avec celle du promoteur HSP70 a permis d'établir que les promoteurs d'actine et de GPD présentaient une activité forte chez P. flocculosa et comparable à celle de HSP70 chez P. antarctica. Enfin, le développement d'une souche de P. flocculosa (Act4) exprimant de façon constitutive la GFP a permis son observation in situ pendant l'interaction tritrophique plante-agent pathogène-agent de lutte biologique. Il a ainsi été possible de montrer ... Thesis Antarc* Antarctica Unknown Champignons ENVELOPE(139.957,139.957,-66.664,-66.664) |
institution |
Open Polar |
collection |
Unknown |
op_collection_id |
fttriple |
language |
French |
topic |
envir geo |
spellingShingle |
envir geo Neveu, Bertrand Nouveaux outils moléculaires pour l'étude des propriétés de Pseudozyma flocculosa |
topic_facet |
envir geo |
description |
Le champignon Pseudozyma flocculosa a été particulièrement étudié pour son activité de lutte biologique contre le blanc. Par génie génétique, une molécule à activité antifongique, la flocculosine, a été isolée et caractérisée. Suite à ces travaux, l'utilisation des champignons du genre Pseudozyma pour la production de protéines recombinantes a présenté un nouvel axe de recherche. Toutefois, la variété des outils moléculaires disponibles pour l'étude des Pseudozyma spp. est limitée aux séquences régulatrices (promoteur, terminateur) du gène HSP70 d'un champignon voisin, Ustilago maydis. Les objectifs de notre recherche étaient donc les suivants : 1) obtenir des séquences promotrices de P. flocculosa; 2) comparer l'activité de ces séquences promotrices avec le promoteur HSP70; et 3) démontrer l'utilité de ces outils moléculaires dans le contexte d'une nouvelle approche d'étude de l'écologie de P. flocculosa. Dans un premier temps, un promoteur spécifique a été ciblé, soit le promoteur du gène d'actine car celui-ci est reconnu comme étant fort et constitutif chez d'autres champignons. En parallèle, un promoteur dont les transcrits étaient parmi les plus abondants dans des conditions de cultures déterminées a été identifié et cloné. Le gène codant pour la glycéraldéhyde 3-phosphate-déshydrogénase (GPD), une enzyme importante du métabolisme carboné de la cellule, a donc pu être cloné et séquencé. Nous avons ainsi obtenu 1133 pb de la séquence promotrice du gène d'actine et 1139 pb du gène GPD de P. flocculosa. Dans un deuxième temps, la comparaison de la force de ces deux promoteurs avec celle du promoteur HSP70 a permis d'établir que les promoteurs d'actine et de GPD présentaient une activité forte chez P. flocculosa et comparable à celle de HSP70 chez P. antarctica. Enfin, le développement d'une souche de P. flocculosa (Act4) exprimant de façon constitutive la GFP a permis son observation in situ pendant l'interaction tritrophique plante-agent pathogène-agent de lutte biologique. Il a ainsi été possible de montrer ... |
author2 |
Bélanger, Richard R. Belzile, François |
format |
Thesis |
author |
Neveu, Bertrand |
author_facet |
Neveu, Bertrand |
author_sort |
Neveu, Bertrand |
title |
Nouveaux outils moléculaires pour l'étude des propriétés de Pseudozyma flocculosa |
title_short |
Nouveaux outils moléculaires pour l'étude des propriétés de Pseudozyma flocculosa |
title_full |
Nouveaux outils moléculaires pour l'étude des propriétés de Pseudozyma flocculosa |
title_fullStr |
Nouveaux outils moléculaires pour l'étude des propriétés de Pseudozyma flocculosa |
title_full_unstemmed |
Nouveaux outils moléculaires pour l'étude des propriétés de Pseudozyma flocculosa |
title_sort |
nouveaux outils moléculaires pour l'étude des propriétés de pseudozyma flocculosa |
publisher |
Université Laval |
publishDate |
2007 |
url |
https://hdl.handle.net/20.500.11794/19657 |
long_lat |
ENVELOPE(139.957,139.957,-66.664,-66.664) |
geographic |
Champignons |
geographic_facet |
Champignons |
genre |
Antarc* Antarctica |
genre_facet |
Antarc* Antarctica |
op_source |
CorpusUL |
op_relation |
http://hdl.handle.net/20.500.11794/19657 |
op_rights |
other |
op_doi |
https://doi.org/20.500.11794/19657 |
_version_ |
1766273536809238528 |