Rôle des oligosaccharides dans les interactions virus-hôte : application à la contamination des huîtres par les Norovirus

• Main Author: Auger, Audrey
• Other Authors: Université de Lille (2022-.), Chirat, Frédéric
• Format: Thesis
• Language: French; English
• Published: 2023
• Subjects: Antigènes de groupes sanguins tissulaires; Hbga; Glycomic; Host-Pathogen interaction; Norovirus; Oyster; Crassostrea gigas
• Online Access: http://www.theses.fr/2023ULILS112/document

Les Norovirus (NoVs) sont la principale cause de gastro-entérite dans le monde. Les contaminations se produisent principalement de personne à personne ou par la consommation d'aliments contaminés comme les fruits, les légumes ou les crustacés. Dans ce dernier cas, l'huître est connue pour être un excellent vecteur, notamment en raison de sa consommation crue, de sa proximité avec les effluents humains, de sa capacité de filtration et de sa rétention spécifique des NoVs. En utilisant différentes lectines, anticorps et virus-like particles (VLPs), il a été démontré que la rétention spécifique des NoVs repose sur la présence de l'antigène A (Ag A) chez l'huître.Afin de mettre en évidence la présence et la distribution d'antigènes de groupes sanguins tissulaires sur les glycoconjugués des espèces d'huîtres Crassostrea gigas et Ostrea edulis, nous avons établi les N et O-glycomes du manteau, des branchies et du tissu digestif. Les N glycannes ont été séquentiellement libérés par la Peptide:N-glycosidase F (PNGase F) et A. Après perméthylation, les analyses structurales par MALDI-QIT-TOF ont révélé la présence des Ags A et A Lewis b (ALeb) pour les deux espèces ainsi que des antigènes H et HLeb uniquement pour O. edulis. La deutéroperméthylation à la place de la perméthylation suivie d'analyses MALDI-MSn ont permis de montrer la présence de N-glycannes naturellement méthylés comme cela a été démontré chez l'huître Crassostrea virginica. Pour identifier les monosaccharides porteurs de groupements méthyles et préciser leur position, les monosaccharides des N glycannes ont été transformés en leur dérivé itol acétate et analysés par chromatographie en phase gazeuse couplée à la spectrométrie de masse EI-MS. Nous avons ainsi pu révéler la présence d'un groupement méthyle sur le carbone 3 des résidus de N acétylgalactosamine des Ags A pour les deux espèces. Des résidus de fucose sont aussi apparus méthylés sur leur carbone 3 ou 4 pour les huîtres C. gigas et O. edulis, respectivement. Ces résidus de méthyl-fucose ont été ...