Neste generasjon radiofarmaka - Potensiell ny behandling av HER-2 positiv brystkreft med terbium-161
Introduksjon og hensikt: Brystkreft er den mest vanlige kreftformen hos kvinner med 3371 nye tilfeller i Norge i 2016. 25-30 % av alle brystkreftceller utrykker uvanlig høye nivåer av en reseptor tyrosin kinase kalt humant epidermal vekstfaktor-2 (HER-2) som er assosiert med dårlig prognose. Trastuz...
Main Author: | |
---|---|
Format: | Master Thesis |
Language: | Norwegian Bokmål |
Published: |
2018
|
Subjects: | |
Online Access: | http://hdl.handle.net/10852/63551 http://urn.nb.no/URN:NBN:no-66103 |
id |
ftoslouniv:oai:www.duo.uio.no:10852/63551 |
---|---|
record_format |
openpolar |
institution |
Open Polar |
collection |
Universitet i Oslo: Digitale utgivelser ved UiO (DUO) |
op_collection_id |
ftoslouniv |
language |
Norwegian Bokmål |
topic |
trastuzumab konjugering radioimmunterapi iTLC DOTA lutetium-177 HER-2 brystkreft terbium-161 chelatering |
spellingShingle |
trastuzumab konjugering radioimmunterapi iTLC DOTA lutetium-177 HER-2 brystkreft terbium-161 chelatering Skåre, Karina Eckell Neste generasjon radiofarmaka - Potensiell ny behandling av HER-2 positiv brystkreft med terbium-161 |
topic_facet |
trastuzumab konjugering radioimmunterapi iTLC DOTA lutetium-177 HER-2 brystkreft terbium-161 chelatering |
description |
Introduksjon og hensikt: Brystkreft er den mest vanlige kreftformen hos kvinner med 3371 nye tilfeller i Norge i 2016. 25-30 % av alle brystkreftceller utrykker uvanlig høye nivåer av en reseptor tyrosin kinase kalt humant epidermal vekstfaktor-2 (HER-2) som er assosiert med dårlig prognose. Trastuzumab er et anti-HER-2 monoklonalt antistoff som brukes i behandling av HER-2 positiv brystkreft. Studier har vist at anti-HER-2 radioimmunterapi (RIT) med [177Lu]Lu-trastuzumab er effektiv i behandling av brystkreft in vitro. Terbium-161 har tilnærmet like radiokjemiske egenskaper som lutetium-177, men emitterer i tillegg et signifikant antall lav-energetiske Auger-elektroner som kan bidra til en bedre effekt i kreftbehandling, og være spesielt nyttig i behandling av små metastaser ved HER-2 positiv brystkreft med spredning. Hovedmålet med denne oppgaven var å fremstille et trastuzumab derivat som er radioaktivt merket med terbium-161, og å sammenligne dette konstruktet med en [177Lu]LuDOTA-trastuzumab analog. Metoder: Trastuzumab ble radioaktivt merket med både lutetium-177 og terbium-161 ved bruk av p-SCN-Bn-DOTA som chelator. Radiokjemisk renhet og stabilitet av de to radioaktivt merkede DOTA-trastuzumab konstruktene [161Tb]TbDOTA-trastuzumab og [177Lu]LuDOTA-trastuzumab ble bestemt ved bruk av instant thin-layer chromatography (iTLC). Parameterene som ble undersøkt var temperatur, radioaktiv konsentrasjon og spesifikk aktivitet. Immunreaktivitet og cytotoksisitet av både [177Lu]LuDOTA-trastuzumab og [161Tb]TbDOTA-trastuzumab ble testet på brystkreft-cellelinjen SKBR-3. Resultater: Prosedyren for konjugering av p-SCN-Bn-DOTA til trastuzumab viste å gi reproduserbare DOTA-trastuzumab konjugater fra gang til gang med tanke på trastuzumab konsentrasjon og stabilitet over tid. I gjennomsnitt ble 5,3 ± 1,1 DOTA-molekyler bundet per trastuzumab. Radioaktiv merking av terbium-161 og lutetium-177 på DOTA-trastuzumab ga konstrukter med en radiokjemisk renhet (RCP) på > 98 % i de fleste forsøkene for både [161Tb]TbDOTA-trastuzumab og [177Lu]LuDOTA-trastuzumab. For [177Lu]LuDOTA-trastuzumab var innmerkingshastigheten i noen tilfeller lavere enn for [161Tb]TbDOTA-trastuzumab. Dette gjaldt spesielt ved tilsetning av lite radioaktivitet til et stort reaksjonsvolum. Stabiliteten uttrykt som RCP (%) over tid var bedre for [177Lu]LuDOTA-trastuzumab sammenlignet med [161Tb]TbDOTA-trastuzumab. For begge konstruktene var stabiliteten dårligst ved høy spesifikk aktivitet og høy radioaktiv konsentrasjon. For DOTA-trastuzumab radioaktivt merket med både lutetium-177 og terbium-161 var RCP > 95 % i opptil 48 timer for prøven med en spesifikk aktivitet på 2,3-30,8 MBq/mg og en radioaktiv konsentrasjon på 10 MBq/mL. Ved en radioaktiv konsentrasjon på opptil 120 MBq/mL var det kun prøvene med [177Lu]LuDOTA-trastuzumab som hadde en RCP-verdi > 95 % etter 48 timer. Stabiliteten ble ikke forbedret ved tilsetning av ulike scavengere til prøveløsningene. Immunreaktiviteten til [177Lu]LuDOTA-trastuzumab ble estimert til å ligge på 87 %. For [161Tb]TbDOTA-trastuzumab ble immunreaktiviteten estimert til å ligge rundt 40 % ved bruk av to andre metoder. Det er grunn til å tro at metodene som ble brukt for å bestemme immunreaktiviteten til [161Tb]TbDOTA-trastuzumab ikke var optimale. Høyere immunreaktivitetsverdier hadde sannsynligvis blitt oppnådd dersom [161Tb]TbDOTA-trastuzumab hadde blitt analysert ved samme metode som brukt på [177Lu]LuDOTA-trastuzumab. Overlevelsesstudiet på SKBR-3 celler som uttrykker HER-2 reseptorer på overflaten viste at [161Tb]TbDOTA-trastuzumab hadde bedre effekt på SKBR-3 celler i form av at færre celler overlevde etter behandling, sammenlignet med [177Lu]LuDOTA-trastuzumab og ren trastuzumab. Dette tyder på at terbium-161 egner seg til bruk i radioimmunterapi mot HER-2 positiv brystkreft. Forskjellen i effekt mellom [161Tb]TbDOTA-trastuzumab og [177Lu]LuDOTA-trastuzumab var på den andre siden ikke signifikant. Det er grunn til å tro at videre optimalisering av forsøksoppsettet vil kunne vise at [161Tb]TbDOTA-trastuzumab har en signifikant bedre effekt enn [177Lu]LuDOTA-trastuzumab på SKBR-3 celler. Konklusjon: Resultatene viste at terbium-161 og lutetium-177 gir tilnærmet like resultater når de merkes inn på DOTA-trastuzumab konjugater, med tanke på både radiokjemisk renhet og stabilitet over tid. Overlevelsesstudiene viste at [161Tb]TbDOTA-trastuzumab trolig har bedre effekt enn [177Lu]LuDOTA-trastuzumab på SKBR-3 celler og dermed kan være en god kandidat i radioimmunterapi mot HER-2 positiv brystkreft. Flere in vitro og in vivo studier bør gjennomføres for å bekrefte dette. |
format |
Master Thesis |
author |
Skåre, Karina Eckell |
author_facet |
Skåre, Karina Eckell |
author_sort |
Skåre, Karina Eckell |
title |
Neste generasjon radiofarmaka - Potensiell ny behandling av HER-2 positiv brystkreft med terbium-161 |
title_short |
Neste generasjon radiofarmaka - Potensiell ny behandling av HER-2 positiv brystkreft med terbium-161 |
title_full |
Neste generasjon radiofarmaka - Potensiell ny behandling av HER-2 positiv brystkreft med terbium-161 |
title_fullStr |
Neste generasjon radiofarmaka - Potensiell ny behandling av HER-2 positiv brystkreft med terbium-161 |
title_full_unstemmed |
Neste generasjon radiofarmaka - Potensiell ny behandling av HER-2 positiv brystkreft med terbium-161 |
title_sort |
neste generasjon radiofarmaka - potensiell ny behandling av her-2 positiv brystkreft med terbium-161 |
publishDate |
2018 |
url |
http://hdl.handle.net/10852/63551 http://urn.nb.no/URN:NBN:no-66103 |
long_lat |
ENVELOPE(8.704,8.704,63.054,63.054) |
geographic |
Merket |
geographic_facet |
Merket |
genre |
Prøven ren |
genre_facet |
Prøven ren |
op_relation |
http://urn.nb.no/URN:NBN:no-66103 Skåre, Karina Eckell. Neste generasjon radiofarmaka - Potensiell ny behandling av HER-2 positiv brystkreft med terbium-161. Master thesis, University of Oslo, 2018 http://hdl.handle.net/10852/63551 URN:NBN:no-66103 Fulltext https://www.duo.uio.no/bitstream/handle/10852/63551/5/Masteroppgave_Karina_Skare.pdf |
op_rights |
Utsatt tilgjengeliggjøring: Kun forskere og studenter kan få innsyn i dokumentet. Tilgangskode/Access code B embargoedaccess |
_version_ |
1766244733112287232 |
spelling |
ftoslouniv:oai:www.duo.uio.no:10852/63551 2023-05-15T18:50:58+02:00 Neste generasjon radiofarmaka - Potensiell ny behandling av HER-2 positiv brystkreft med terbium-161 Next generation radiopharmaceuticals - Potential new treatment of HER-2 positive breast cancer using terbium-161 Skåre, Karina Eckell 2018 http://hdl.handle.net/10852/63551 http://urn.nb.no/URN:NBN:no-66103 nob nob http://urn.nb.no/URN:NBN:no-66103 Skåre, Karina Eckell. Neste generasjon radiofarmaka - Potensiell ny behandling av HER-2 positiv brystkreft med terbium-161. Master thesis, University of Oslo, 2018 http://hdl.handle.net/10852/63551 URN:NBN:no-66103 Fulltext https://www.duo.uio.no/bitstream/handle/10852/63551/5/Masteroppgave_Karina_Skare.pdf Utsatt tilgjengeliggjøring: Kun forskere og studenter kan få innsyn i dokumentet. Tilgangskode/Access code B embargoedaccess trastuzumab konjugering radioimmunterapi iTLC DOTA lutetium-177 HER-2 brystkreft terbium-161 chelatering Master thesis Masteroppgave 2018 ftoslouniv 2020-06-21T08:52:10Z Introduksjon og hensikt: Brystkreft er den mest vanlige kreftformen hos kvinner med 3371 nye tilfeller i Norge i 2016. 25-30 % av alle brystkreftceller utrykker uvanlig høye nivåer av en reseptor tyrosin kinase kalt humant epidermal vekstfaktor-2 (HER-2) som er assosiert med dårlig prognose. Trastuzumab er et anti-HER-2 monoklonalt antistoff som brukes i behandling av HER-2 positiv brystkreft. Studier har vist at anti-HER-2 radioimmunterapi (RIT) med [177Lu]Lu-trastuzumab er effektiv i behandling av brystkreft in vitro. Terbium-161 har tilnærmet like radiokjemiske egenskaper som lutetium-177, men emitterer i tillegg et signifikant antall lav-energetiske Auger-elektroner som kan bidra til en bedre effekt i kreftbehandling, og være spesielt nyttig i behandling av små metastaser ved HER-2 positiv brystkreft med spredning. Hovedmålet med denne oppgaven var å fremstille et trastuzumab derivat som er radioaktivt merket med terbium-161, og å sammenligne dette konstruktet med en [177Lu]LuDOTA-trastuzumab analog. Metoder: Trastuzumab ble radioaktivt merket med både lutetium-177 og terbium-161 ved bruk av p-SCN-Bn-DOTA som chelator. Radiokjemisk renhet og stabilitet av de to radioaktivt merkede DOTA-trastuzumab konstruktene [161Tb]TbDOTA-trastuzumab og [177Lu]LuDOTA-trastuzumab ble bestemt ved bruk av instant thin-layer chromatography (iTLC). Parameterene som ble undersøkt var temperatur, radioaktiv konsentrasjon og spesifikk aktivitet. Immunreaktivitet og cytotoksisitet av både [177Lu]LuDOTA-trastuzumab og [161Tb]TbDOTA-trastuzumab ble testet på brystkreft-cellelinjen SKBR-3. Resultater: Prosedyren for konjugering av p-SCN-Bn-DOTA til trastuzumab viste å gi reproduserbare DOTA-trastuzumab konjugater fra gang til gang med tanke på trastuzumab konsentrasjon og stabilitet over tid. I gjennomsnitt ble 5,3 ± 1,1 DOTA-molekyler bundet per trastuzumab. Radioaktiv merking av terbium-161 og lutetium-177 på DOTA-trastuzumab ga konstrukter med en radiokjemisk renhet (RCP) på > 98 % i de fleste forsøkene for både [161Tb]TbDOTA-trastuzumab og [177Lu]LuDOTA-trastuzumab. For [177Lu]LuDOTA-trastuzumab var innmerkingshastigheten i noen tilfeller lavere enn for [161Tb]TbDOTA-trastuzumab. Dette gjaldt spesielt ved tilsetning av lite radioaktivitet til et stort reaksjonsvolum. Stabiliteten uttrykt som RCP (%) over tid var bedre for [177Lu]LuDOTA-trastuzumab sammenlignet med [161Tb]TbDOTA-trastuzumab. For begge konstruktene var stabiliteten dårligst ved høy spesifikk aktivitet og høy radioaktiv konsentrasjon. For DOTA-trastuzumab radioaktivt merket med både lutetium-177 og terbium-161 var RCP > 95 % i opptil 48 timer for prøven med en spesifikk aktivitet på 2,3-30,8 MBq/mg og en radioaktiv konsentrasjon på 10 MBq/mL. Ved en radioaktiv konsentrasjon på opptil 120 MBq/mL var det kun prøvene med [177Lu]LuDOTA-trastuzumab som hadde en RCP-verdi > 95 % etter 48 timer. Stabiliteten ble ikke forbedret ved tilsetning av ulike scavengere til prøveløsningene. Immunreaktiviteten til [177Lu]LuDOTA-trastuzumab ble estimert til å ligge på 87 %. For [161Tb]TbDOTA-trastuzumab ble immunreaktiviteten estimert til å ligge rundt 40 % ved bruk av to andre metoder. Det er grunn til å tro at metodene som ble brukt for å bestemme immunreaktiviteten til [161Tb]TbDOTA-trastuzumab ikke var optimale. Høyere immunreaktivitetsverdier hadde sannsynligvis blitt oppnådd dersom [161Tb]TbDOTA-trastuzumab hadde blitt analysert ved samme metode som brukt på [177Lu]LuDOTA-trastuzumab. Overlevelsesstudiet på SKBR-3 celler som uttrykker HER-2 reseptorer på overflaten viste at [161Tb]TbDOTA-trastuzumab hadde bedre effekt på SKBR-3 celler i form av at færre celler overlevde etter behandling, sammenlignet med [177Lu]LuDOTA-trastuzumab og ren trastuzumab. Dette tyder på at terbium-161 egner seg til bruk i radioimmunterapi mot HER-2 positiv brystkreft. Forskjellen i effekt mellom [161Tb]TbDOTA-trastuzumab og [177Lu]LuDOTA-trastuzumab var på den andre siden ikke signifikant. Det er grunn til å tro at videre optimalisering av forsøksoppsettet vil kunne vise at [161Tb]TbDOTA-trastuzumab har en signifikant bedre effekt enn [177Lu]LuDOTA-trastuzumab på SKBR-3 celler. Konklusjon: Resultatene viste at terbium-161 og lutetium-177 gir tilnærmet like resultater når de merkes inn på DOTA-trastuzumab konjugater, med tanke på både radiokjemisk renhet og stabilitet over tid. Overlevelsesstudiene viste at [161Tb]TbDOTA-trastuzumab trolig har bedre effekt enn [177Lu]LuDOTA-trastuzumab på SKBR-3 celler og dermed kan være en god kandidat i radioimmunterapi mot HER-2 positiv brystkreft. Flere in vitro og in vivo studier bør gjennomføres for å bekrefte dette. Master Thesis Prøven ren Universitet i Oslo: Digitale utgivelser ved UiO (DUO) Merket ENVELOPE(8.704,8.704,63.054,63.054) |