Estandarización de la obtención de amplificados del genoma del virus de la rabia para su uso en estudios de epidemiología molecular
Con el fin de perfeccionar el diagnóstico y la tipificación del virus de la rabia en Colombia, el Laboratorio Nacional de Referencia del Instituto Nacional de Salud estandarizó técnicas para amplificar un fragmento de ADN complementario (ADNc) a una fracción de 902 nucleótidos seleccionados del ARN...
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Instituto Nacional de Salud
2002
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ftdoajarticles:oai:doaj.org/article:e7d28e1eb6854a8d844e064739682ee5 2023-05-15T15:10:03+02:00 Estandarización de la obtención de amplificados del genoma del virus de la rabia para su uso en estudios de epidemiología molecular Andrés Páez Clemencia García Jorge Boschell 2002-03-01T00:00:00Z https://doi.org/10.7705/biomedica.v22i1.1142 https://doaj.org/article/e7d28e1eb6854a8d844e064739682ee5 EN ES eng spa Instituto Nacional de Salud http://www.revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/1142 https://doaj.org/toc/0120-4157 0120-4157 doi:10.7705/biomedica.v22i1.1142 https://doaj.org/article/e7d28e1eb6854a8d844e064739682ee5 Biomédica: revista del Instituto Nacional de Salud, Vol 22, Iss 1, Pp 71-6 (2002) rabies virus molecular epidemiology Medicine R Arctic medicine. Tropical medicine RC955-962 article 2002 ftdoajarticles https://doi.org/10.7705/biomedica.v22i1.1142 2022-12-30T23:12:40Z Con el fin de perfeccionar el diagnóstico y la tipificación del virus de la rabia en Colombia, el Laboratorio Nacional de Referencia del Instituto Nacional de Salud estandarizó técnicas para amplificar un fragmento de ADN complementario (ADNc) a una fracción de 902 nucleótidos seleccionados del ARN del virus de la rabia. La fracción mencionada contiene secuencias que codifican para los aminoácidos 447-525 de la glicoproteína y 1-35 de la proteína L. Además, contiene la región intergénica no codificante conocida como Pseudogen Psi. Las técnicas estandarizadas consistieron en: 1) amplificación biológica mediante reaislamiento del virus en ratón ICR, 2) extracción del ARN total a partir del cerebro del ratón infectado, y 3) amplificación molecular utilizando la técnica de transcripción reversa y reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR) para obtener el ADNc. La muestra del estudio constó de 30 cepas de virus de rabia obtenidas originalmente de 30 caninos y tomadas del banco del Laboratorio de Virología. Por su simplicidad, la metodología descrita en este estudio presenta grandes ventajas sobre las técnicas descritas en anteriores estudios. La tecnología propuesta es un complemento preciso de las técnicas de diagnóstico de la rabia; además, se aplica a la identificación de relaciones filogenéticas de diversos aislamientos y, por ende, se utiliza en la identificación de las dinámicas de transmisión y difusión geográfica del virus rábico. Article in Journal/Newspaper Arctic Directory of Open Access Journals: DOAJ Articles Arctic Referencia Psi ENVELOPE(-63.000,-63.000,-64.300,-64.300) Cadena ENVELOPE(-67.600,-67.600,-67.450,-67.450) Biomédica 22 1 71 |
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Con el fin de perfeccionar el diagnóstico y la tipificación del virus de la rabia en Colombia, el Laboratorio Nacional de Referencia del Instituto Nacional de Salud estandarizó técnicas para amplificar un fragmento de ADN complementario (ADNc) a una fracción de 902 nucleótidos seleccionados del ARN del virus de la rabia. La fracción mencionada contiene secuencias que codifican para los aminoácidos 447-525 de la glicoproteína y 1-35 de la proteína L. Además, contiene la región intergénica no codificante conocida como Pseudogen Psi. Las técnicas estandarizadas consistieron en: 1) amplificación biológica mediante reaislamiento del virus en ratón ICR, 2) extracción del ARN total a partir del cerebro del ratón infectado, y 3) amplificación molecular utilizando la técnica de transcripción reversa y reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR) para obtener el ADNc. La muestra del estudio constó de 30 cepas de virus de rabia obtenidas originalmente de 30 caninos y tomadas del banco del Laboratorio de Virología. Por su simplicidad, la metodología descrita en este estudio presenta grandes ventajas sobre las técnicas descritas en anteriores estudios. La tecnología propuesta es un complemento preciso de las técnicas de diagnóstico de la rabia; además, se aplica a la identificación de relaciones filogenéticas de diversos aislamientos y, por ende, se utiliza en la identificación de las dinámicas de transmisión y difusión geográfica del virus rábico. |
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