Obtención de una sonda para cuantificar el mARN del factor activador de la transcripción STAT5 en rata

• Published in: Biomédica
• Main Authors: Blanca L. Ortíz, Myriam Sánchez de Gómez, Gunnar Norstedt
• Format: Article in Journal/Newspaper
• Language: English; Spanish
• Published: Instituto Nacional de Salud 1998
• Subjects: Medicine; R; Arctic medicine. Tropical medicine; RC955-962; Arctic; Rata
• Online Access: https://doi.org/10.7705/biomedica.v18i3.989; https://doaj.org/article/d243d4935799494ea194490bfe43d3a2

Se describe la estrategia empleada para clonar, en un vector de expresión, un fragmento del gen de STAT5 amplificado por la técnica de PCR. Variando la concentración de magnesio y la temperatura de alineación, se logró amplificar el fragmento deseado a partir de un cADN de STAT5b de ratón. El producto de PCR se clonó y se comprobó la identidad de la sonda mediante análisis de restricción y secuenciación. Esta sonda se usó en el ensayo de protección con ribonucleasa A o hibridización en solución, para cuantificar el mARN de STAT5 en hígado y linfocitos de timo de ratas hembras. Se encontró una mayor expresión del mARN de STAT5 en hígado.