Producción y purificación de la proteína core del virus de la hepatitis C en el sistema de expresión del baculovirus para ensayos biológicos.
Introducción. La infección por el virus de la hepatitis C (VHC) se caracteriza por la alta frecuencia de infección persistente. La capacidad del VHC para inducir alteraciones en la función de las células del sistema inmune, específicamente en las células dendríticas, parece ser una de las estrategia...
Published in: | Biomédica |
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Instituto Nacional de Salud
2005
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ftdoajarticles:oai:doaj.org/article:b64bc7a66a8e4de0895182ce358696ac 2023-05-15T15:12:36+02:00 Producción y purificación de la proteína core del virus de la hepatitis C en el sistema de expresión del baculovirus para ensayos biológicos. Ivonne Rubio Alba Lucía Cómbita Blanca Ortiz Reyes María Cristina Navas 2005-03-01T00:00:00Z https://doi.org/10.7705/biomedica.v25i1.1325 https://doaj.org/article/b64bc7a66a8e4de0895182ce358696ac EN ES eng spa Instituto Nacional de Salud http://www.revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/1325 https://doaj.org/toc/0120-4157 0120-4157 doi:10.7705/biomedica.v25i1.1325 https://doaj.org/article/b64bc7a66a8e4de0895182ce358696ac Biomédica: revista del Instituto Nacional de Salud, Vol 25, Iss 1, Pp 34-45 (2005) hepatitis C Virus core protein baculovirus expression system isoelectrofocusing electroelution Medicine R Arctic medicine. Tropical medicine RC955-962 article 2005 ftdoajarticles https://doi.org/10.7705/biomedica.v25i1.1325 2022-12-30T23:48:37Z Introducción. La infección por el virus de la hepatitis C (VHC) se caracteriza por la alta frecuencia de infección persistente. La capacidad del VHC para inducir alteraciones en la función de las células del sistema inmune, específicamente en las células dendríticas, parece ser una de las estrategias virales implicada en el establecimiento de la infección persistente. Esta estrategia parece estar mediada en gran parte por una de las proteínas estructurales codificada por el genoma del VHC, la proteína Core, unidad estructural de la cápside viral. Objetivo. Una de las limitantes para la evaluación de las propiedades de Core es la obtención y la purificación de la proteína nativa (191 aa). El objetivo de este estudio fue la producción y la purificación de la proteína Core completa en un sistema eucariote para evaluar las propiedades de la proteína en cultivos de células dendríticas humanas. Resultados. En este estudio se logró la producción de la proteína Core completa en el sistema de expresión de baculovirus y su purificación por la técnica de separación por punto isoeléctrico y electroelución. La pureza de la proteína obtenida se confirmó por Western blot y tinción con plata. Estos análisis mostraron dos bandas únicas correspondientes a las isoformas p23 y p21 de la proteína Core, previamente descritas en la literatura. Conclusiones. La proteína obtenida posee varias de las condiciones de la proteína Core nativa, como peso molecular, isoformas y localización subcelular. Los procedimientos descritos en este artículo son aplicables a proteínas asociadas a membranas producidas en sistemas de expresión eucarióticos. Article in Journal/Newspaper Arctic Directory of Open Access Journals: DOAJ Articles Alta Arctic Biomédica 25 1 34 |
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Introducción. La infección por el virus de la hepatitis C (VHC) se caracteriza por la alta frecuencia de infección persistente. La capacidad del VHC para inducir alteraciones en la función de las células del sistema inmune, específicamente en las células dendríticas, parece ser una de las estrategias virales implicada en el establecimiento de la infección persistente. Esta estrategia parece estar mediada en gran parte por una de las proteínas estructurales codificada por el genoma del VHC, la proteína Core, unidad estructural de la cápside viral. Objetivo. Una de las limitantes para la evaluación de las propiedades de Core es la obtención y la purificación de la proteína nativa (191 aa). El objetivo de este estudio fue la producción y la purificación de la proteína Core completa en un sistema eucariote para evaluar las propiedades de la proteína en cultivos de células dendríticas humanas. Resultados. En este estudio se logró la producción de la proteína Core completa en el sistema de expresión de baculovirus y su purificación por la técnica de separación por punto isoeléctrico y electroelución. La pureza de la proteína obtenida se confirmó por Western blot y tinción con plata. Estos análisis mostraron dos bandas únicas correspondientes a las isoformas p23 y p21 de la proteína Core, previamente descritas en la literatura. Conclusiones. La proteína obtenida posee varias de las condiciones de la proteína Core nativa, como peso molecular, isoformas y localización subcelular. Los procedimientos descritos en este artículo son aplicables a proteínas asociadas a membranas producidas en sistemas de expresión eucarióticos. |
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