Desarrollo de una técnica de inmunoelectrotransferencia "Westernblot" para la detección de anticuerpos contra componentes proteínicos de Salmonella Typhi
Desde su desarrollo la lnmunoelectrotransferencia (INMET) ha sido una herramienta útil en biología molecular así como también en el diagnóstico de diferentes enfermedades infecciosas. Tradicionalniente la demostración de anticuerpos contra Salmonella typhi, se ha enfocado hacia la detección de aquel...
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Instituto Nacional de Salud
1990
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ftdoajarticles:oai:doaj.org/article:b5ee1fec87c1446eb512b3b503e8e3c7 2023-05-15T15:12:15+02:00 Desarrollo de una técnica de inmunoelectrotransferencia "Westernblot" para la detección de anticuerpos contra componentes proteínicos de Salmonella Typhi Miguel Guzmán Urrego Carmen Alicia Niño Luz Marleny Sierra 1990-12-01T00:00:00Z https://doi.org/10.7705/biomedica.v10i1-4.1989 https://doaj.org/article/b5ee1fec87c1446eb512b3b503e8e3c7 EN ES eng spa Instituto Nacional de Salud http://www.revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/1989 https://doaj.org/toc/0120-4157 0120-4157 doi:10.7705/biomedica.v10i1-4.1989 https://doaj.org/article/b5ee1fec87c1446eb512b3b503e8e3c7 Biomédica: revista del Instituto Nacional de Salud, Vol 10, Iss 1-4, Pp 11-18 (1990) Medicine R Arctic medicine. Tropical medicine RC955-962 article 1990 ftdoajarticles https://doi.org/10.7705/biomedica.v10i1-4.1989 2022-12-30T23:59:20Z Desde su desarrollo la lnmunoelectrotransferencia (INMET) ha sido una herramienta útil en biología molecular así como también en el diagnóstico de diferentes enfermedades infecciosas. Tradicionalniente la demostración de anticuerpos contra Salmonella typhi, se ha enfocado hacia la detección de aquellos, que se producen contra lipopolisacáridos, especialmente los que se relacionan con el antígeno somático "0". Pero pocos trabajos, se han realizado para la detección de anticuerpos contra otros antígenos tales como proteínas protoplasmáticas. Este trabajo intenta demostrar si tales anticuerpos se producen en conejos inmunizados experimentalmente, así como también en voluntarios vacunados contra la fiebre Tifoidea con lavacuna oral (cepa Ty21a). El antígeno preparado y purificado a partir de una cepa de Salmonella typhi, fue suspendido en una solución tampón y sonicado para obtener sus productos celulares; de esta manera y con la adecuada concentración de proteínas fue separado en gel de poliacrilamida en sus diferentes fracciones antigénicas y luego transferidos a membranas de nitrocelulosa en donde por medio de reacción inmunoenzimática, se visualizó la banda característica, al poner en contacto la membrana con el antisuero hiperinmune obtenido en conejos (Modelo Experimental) y el suero de voluntarios antes y después de la inmunización (Modelo Humano). La banda visualizada correspondió a un peso aproximado de 38.000 kd. Trece de los voluntarios (32.5%), presentaron esta misma banda antes de la inmunización, la cual, aunque más tenue, representó un complejo antígeno-anticuerpo, lo cual, induce a pensar en un posible contacto con el microorganismo en el pasado. La posibilidad de la reacción cruzada se descartó realizando el mismo procedimiento con lisados de Escherichia coli. Article in Journal/Newspaper Arctic Directory of Open Access Journals: DOAJ Articles Arctic Biomédica 10 1-4 11 |
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Desde su desarrollo la lnmunoelectrotransferencia (INMET) ha sido una herramienta útil en biología molecular así como también en el diagnóstico de diferentes enfermedades infecciosas. Tradicionalniente la demostración de anticuerpos contra Salmonella typhi, se ha enfocado hacia la detección de aquellos, que se producen contra lipopolisacáridos, especialmente los que se relacionan con el antígeno somático "0". Pero pocos trabajos, se han realizado para la detección de anticuerpos contra otros antígenos tales como proteínas protoplasmáticas. Este trabajo intenta demostrar si tales anticuerpos se producen en conejos inmunizados experimentalmente, así como también en voluntarios vacunados contra la fiebre Tifoidea con lavacuna oral (cepa Ty21a). El antígeno preparado y purificado a partir de una cepa de Salmonella typhi, fue suspendido en una solución tampón y sonicado para obtener sus productos celulares; de esta manera y con la adecuada concentración de proteínas fue separado en gel de poliacrilamida en sus diferentes fracciones antigénicas y luego transferidos a membranas de nitrocelulosa en donde por medio de reacción inmunoenzimática, se visualizó la banda característica, al poner en contacto la membrana con el antisuero hiperinmune obtenido en conejos (Modelo Experimental) y el suero de voluntarios antes y después de la inmunización (Modelo Humano). La banda visualizada correspondió a un peso aproximado de 38.000 kd. Trece de los voluntarios (32.5%), presentaron esta misma banda antes de la inmunización, la cual, aunque más tenue, representó un complejo antígeno-anticuerpo, lo cual, induce a pensar en un posible contacto con el microorganismo en el pasado. La posibilidad de la reacción cruzada se descartó realizando el mismo procedimiento con lisados de Escherichia coli. |
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