Comparación de diferentes sondas de DNA para la detección de Plasmodium falciparum
Las sondas pRepHind, Rep20, p242B1-1, pPF-14, clon 26 y clon 34 se compararon a fin de examinar su capacidad para detectar P. falciparum en estudios de campo. Noventa y cuatro muestras de pacientes procedentes de Tumaco, región endémica de malaria situada en la Costa Pacífica Colombiana y 78 muestra...
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Instituto Nacional de Salud
1989
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ftdoajarticles:oai:doaj.org/article:a47d51594d024e0591734c829bb4007e 2023-05-15T15:09:16+02:00 Comparación de diferentes sondas de DNA para la detección de Plasmodium falciparum L. Eugenio Andrade Libia E. Cardona Claudia H. Vergara 1989-12-01T00:00:00Z https://doi.org/10.7705/biomedica.v9i3-4.1978 https://doaj.org/article/a47d51594d024e0591734c829bb4007e EN ES eng spa Instituto Nacional de Salud http://www.revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/1978 https://doaj.org/toc/0120-4157 0120-4157 doi:10.7705/biomedica.v9i3-4.1978 https://doaj.org/article/a47d51594d024e0591734c829bb4007e Biomédica: revista del Instituto Nacional de Salud, Vol 9, Iss 3-4, Pp 83-92 (1989) Medicine R Arctic medicine. Tropical medicine RC955-962 article 1989 ftdoajarticles https://doi.org/10.7705/biomedica.v9i3-4.1978 2022-12-30T21:16:36Z Las sondas pRepHind, Rep20, p242B1-1, pPF-14, clon 26 y clon 34 se compararon a fin de examinar su capacidad para detectar P. falciparum en estudios de campo. Noventa y cuatro muestras de pacientes procedentes de Tumaco, región endémica de malaria situada en la Costa Pacífica Colombiana y 78 muestras provenientes de Villavicencio (Llanos Orientales), se estudiaron en experimentos de hibridación en "dot-blot". Las sondas Rep 20, p242B1-1, pRepHind y pPF-14 detectaron hasta 17 pg de DNA purificado de P. falciparum, mientras que los clones 26 y 34 detectaron 425 pg de DNA. Las sondas pPF-14, p242B1-1, pRepHind y Rep 20 mostraron niveles comparables de detección en muestras de sangre infectada. La sensibilidad mostró variaciones desde 75-94% en sujetos con parasitemias mayores de 10.000 par. a 15-42% en sujetos con parasitemias menores de 100 par. .Las sondas pPF-14 y p242B1-1 mostraron la mayor sensibilidad, mientras que los clones 26 y 34 presentaron niveles de detección significativamente menores. Todas las sondas demostraron ser altamente específicas. Los niveles de detección fueron dependientes del tratamiento de la muestra. El tratamiento consiste en eliminación del suero, lisis con Triton X-100, digestión con Proteinasa K, extracción con Fenol y Cloroformo, y precipitación con etanol condujo a niveles de detección del 100% cuando se realizó en muestras con parasitemias igual y/o mayores de 1.000 par. Article in Journal/Newspaper Arctic Directory of Open Access Journals: DOAJ Articles Arctic Triton ENVELOPE(-55.615,-55.615,49.517,49.517) Biomédica 9 3-4 83 |
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Las sondas pRepHind, Rep20, p242B1-1, pPF-14, clon 26 y clon 34 se compararon a fin de examinar su capacidad para detectar P. falciparum en estudios de campo. Noventa y cuatro muestras de pacientes procedentes de Tumaco, región endémica de malaria situada en la Costa Pacífica Colombiana y 78 muestras provenientes de Villavicencio (Llanos Orientales), se estudiaron en experimentos de hibridación en "dot-blot". Las sondas Rep 20, p242B1-1, pRepHind y pPF-14 detectaron hasta 17 pg de DNA purificado de P. falciparum, mientras que los clones 26 y 34 detectaron 425 pg de DNA. Las sondas pPF-14, p242B1-1, pRepHind y Rep 20 mostraron niveles comparables de detección en muestras de sangre infectada. La sensibilidad mostró variaciones desde 75-94% en sujetos con parasitemias mayores de 10.000 par. a 15-42% en sujetos con parasitemias menores de 100 par. .Las sondas pPF-14 y p242B1-1 mostraron la mayor sensibilidad, mientras que los clones 26 y 34 presentaron niveles de detección significativamente menores. Todas las sondas demostraron ser altamente específicas. Los niveles de detección fueron dependientes del tratamiento de la muestra. El tratamiento consiste en eliminación del suero, lisis con Triton X-100, digestión con Proteinasa K, extracción con Fenol y Cloroformo, y precipitación con etanol condujo a niveles de detección del 100% cuando se realizó en muestras con parasitemias igual y/o mayores de 1.000 par. |
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