Producción de la proteína recombinante JAK2 de ratón
El presente trabajo describe la producción de la proteina recombinante JAK2, empleando un sistema de vectores de expresión baculovirales. La infección de células Sf9, derivadas del tejido de ovario de Spodoptera frugiperda, permitió establecer las condiciones óptimas de dilución del virus en 10 pllm...
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ftdoajarticles:oai:doaj.org/article:7e602c0207d34b5a8d75dda843232407 2023-05-15T15:02:59+02:00 Producción de la proteína recombinante JAK2 de ratón Ruth E. Garzón Amílcar Flores Cecilia Anzola Myriam Sánchez de Gómez 2000-03-01T00:00:00Z https://doi.org/10.7705/biomedica.v20i1.1042 https://doaj.org/article/7e602c0207d34b5a8d75dda843232407 EN ES eng spa Instituto Nacional de Salud http://www.revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/1042 https://doaj.org/toc/0120-4157 0120-4157 doi:10.7705/biomedica.v20i1.1042 https://doaj.org/article/7e602c0207d34b5a8d75dda843232407 Biomédica: revista del Instituto Nacional de Salud, Vol 20, Iss 1, Pp 10-7 (2000) JAK2 growth hormone (GH) growth hormone receptor (GHR) baculovirus Medicine R Arctic medicine. Tropical medicine RC955-962 article 2000 ftdoajarticles https://doi.org/10.7705/biomedica.v20i1.1042 2022-12-30T23:59:11Z El presente trabajo describe la producción de la proteina recombinante JAK2, empleando un sistema de vectores de expresión baculovirales. La infección de células Sf9, derivadas del tejido de ovario de Spodoptera frugiperda, permitió establecer las condiciones óptimas de dilución del virus en 10 pllml de medio y de tiempo de recolección en 72 horas postinfección. Se recolectaron y ultrafiltraron extractos correspondientes a la infección de 5 x 10' células, aproximadamente, y se sometieron a cromatografia de intercambio iónico (DEAE-Sephacel), lográndose purificar parcialmente la proteina JAK2 por medio de un gradiente continuo de fuerza iónica (NaCI 10-500 mM). La presencia de JAK2 se verificó por Western blot, empleando un anticuerpo policlonal producido en conejo contra los residuos 758-776 de JAK2 de ratón. Los resultados indicaron que la proteína obtenida por este sistema de expresión se sintetiza en forma fosforiladalactivada. Article in Journal/Newspaper Arctic Directory of Open Access Journals: DOAJ Articles Arctic Biomédica 20 1 10 |
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El presente trabajo describe la producción de la proteina recombinante JAK2, empleando un sistema de vectores de expresión baculovirales. La infección de células Sf9, derivadas del tejido de ovario de Spodoptera frugiperda, permitió establecer las condiciones óptimas de dilución del virus en 10 pllml de medio y de tiempo de recolección en 72 horas postinfección. Se recolectaron y ultrafiltraron extractos correspondientes a la infección de 5 x 10' células, aproximadamente, y se sometieron a cromatografia de intercambio iónico (DEAE-Sephacel), lográndose purificar parcialmente la proteina JAK2 por medio de un gradiente continuo de fuerza iónica (NaCI 10-500 mM). La presencia de JAK2 se verificó por Western blot, empleando un anticuerpo policlonal producido en conejo contra los residuos 758-776 de JAK2 de ratón. Los resultados indicaron que la proteína obtenida por este sistema de expresión se sintetiza en forma fosforiladalactivada. |
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