Detección molecular del virus de la fiebre amarilla en muestras de suero de casos fatales humanos y en cerebros de ratón.
Hemos adaptado un método molecular basado en la técnica de transcripción reversa seguida de la reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR) para diagnóstico alternativo de la infección por el virus de la fiebre amarilla. Se tomaron tres sueros liofilizados de casos fatales de fiebre amarilla y cuatr...
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Instituto Nacional de Salud
2003
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ftdoajarticles:oai:doaj.org/article:540a6dfb6f414c11a5b892fbec4b663c 2023-05-15T15:12:10+02:00 Detección molecular del virus de la fiebre amarilla en muestras de suero de casos fatales humanos y en cerebros de ratón. Jairo A. Méndez Gerzaín Rodríguez María del Pilar Bernal Dora de Calvache Jorge Boshell 2003-06-01T00:00:00Z https://doi.org/10.7705/biomedica.v23i2.1216 https://doaj.org/article/540a6dfb6f414c11a5b892fbec4b663c EN ES eng spa Instituto Nacional de Salud http://www.revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/1216 https://doaj.org/toc/0120-4157 0120-4157 doi:10.7705/biomedica.v23i2.1216 https://doaj.org/article/540a6dfb6f414c11a5b892fbec4b663c Biomédica: revista del Instituto Nacional de Salud, Vol 23, Iss 2, Pp 232-8 (2003) yellow fever virus RT-PCR diagnostic tools Medicine R Arctic medicine. Tropical medicine RC955-962 article 2003 ftdoajarticles https://doi.org/10.7705/biomedica.v23i2.1216 2022-12-31T00:47:01Z Hemos adaptado un método molecular basado en la técnica de transcripción reversa seguida de la reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR) para diagnóstico alternativo de la infección por el virus de la fiebre amarilla. Se tomaron tres sueros liofilizados de casos fatales de fiebre amarilla y cuatro sueros frescos, de los cuales tres pertenecían a casos fatales de la enfermedad y el cuarto a un paciente sintomático con serología IgM positiva para fiebre amarilla; los sueros fueron tratados con Trizol-LS® para extraer el ARN viral que fue sometido a reacción de RT y posteriormente a PCR, para la cual se diseñaron dos parejas de iniciadores específicos de fiebre amarilla: iniciadores directos (sentido) JM2104 (5´-CGTTGGGAGAGGAGATTC-3´) y JM2249 (5´-TTCTTCACTTCGGTTGGG-3´), e iniciadores inversos (antisentido) JM2673 (5´- TCATCTGCCCTGCTTCTC-3´) y JM2751 (5´-CCTCTCTGGTAAACATTCT-3´). La aplicación de la técnica en tejidos se hizo en cerebros de ratón infectados con el virus amarílico, tratados con una solución de lisis antes de purificar el ARN. En geles de agarosa se observaron bandas únicas de amplificación del tamaño esperado (569 pb y 502 pb); todas las muestras fueron corroboradas con las dos parejas de iniciadores y en dos de las muestras de suero fresco los resultados positivos para fiebre amarilla fueron comprobados con estudio histopatológico. Este método de detección molecular permitió demostrar de manera rápida y eficiente la presencia del virus de la fiebre amarilla, hecho que tiene importantes implicaciones diagnósticas para este problema de salud pública. Article in Journal/Newspaper Arctic Directory of Open Access Journals: DOAJ Articles Arctic Cadena ENVELOPE(-67.600,-67.600,-67.450,-67.450) Biomédica 23 2 232 |
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