Prolactina activa la respuesta inmune innata en leucocitos de salmo salar y sparus aurata: rol de jak2/stat, nf-kb y pkc
Prolactina (PRL), una hormona peptídica producida por la glándula pituitaria, juega un rol importante en la modulación del sistema inmune de vertebrados inferiores v _. . ' . . superiores. Con el propósito de investigar el efecto de PRL en la activación de fagocitos profesionales de peces se es...
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ftconicyt:oai:localhost:10533/180180 2023-05-15T18:09:50+02:00 Prolactina activa la respuesta inmune innata en leucocitos de salmo salar y sparus aurata: rol de jak2/stat, nf-kb y pkc Olavarría-Contreras, Víctor Hugo Figueroa-V, Jaime E Universidad Austral de Chile chi Valdivia http://hdl.handle.net/10533/180180 spa spa instname: Conicyt reponame: Repositorio Digital RI2.0 info:eu-repo/grantAgreement/PFCHA-Becas/RI20 info:eu-repo/semantics/dataset/hdl.handle.net/10533/93488 http://hdl.handle.net/10533/180180 info:eu-repo/semantics/openAccess Atribución-NoComercial-SinDerivadas 3.0 Chile info:eu-repo/semantics/doctoralThesis ftconicyt 2019-09-07T08:09:37Z Prolactina (PRL), una hormona peptídica producida por la glándula pituitaria, juega un rol importante en la modulación del sistema inmune de vertebrados inferiores v _. . ' . . superiores. Con el propósito de investigar el efecto de PRL en la activación de fagocitos profesionales de peces se estimuló 'leucocitos .de cabeza de riñón, macrófagos purificados de dorada (Sparus aurata) y células SHK- l con varias concentraciones fisiológicas de PRL nativa de salmón y se analizó el estallido respiratorio y el perfil de expresión de citoquinas proinflamatorias. Los resultados muestran que PRL es capaz de inducir la producción de ROS y la expresión de IL-1 ~, TNF-a, p47phox, p67phox, gp91 phox e IRF-1. Todas las ' actividades de PRL fueron · bloqueadas con anticuerpo anti-PRL e inhibidores farmacológicos de las vías de señalización Jak/ Stat, PKC- y/o NF-KB. Adicionalmente, EMSA, HPLC/MS confirmó que Stat y NF-KB están involucrados en la activación de leucocitos de peces incubados con PRL. Finalmente, se clonó y secuenció los cDNAs codificantes de los componentes p47phox, p67phox y gp91phox del complejo NADPH oxida~a de salmón del Atlántico (Salmo salar) por medio de aproximaciones de clonación homóloga. Comparación de la secuencia aminoácida deducida, muestra que los componentes p47phox, p67phox y gp91phox de S. salar tiene un 51,45 y 68% de identidad con las subunidades de humanos, respect-ivamente. Adicionalmente, en este trabajo se muestra por primera vez que la activaciÓn de macrófagos en peces por PRL o lipopolisacárido promueve la activación de PKC la cual fosforila a p47phox, guiando a la activación de NADPH oxidasa y la .· generación de especies reactivas del oxígeno. Colectivamente, esta información identifica a PRL, como un regulador clave de la activación de fagocitos profesionales de peces y sugiere que el mecanismo de activación del complejo NADPH oxidasa está bien conservado desde peces hasta mamíferos. Doctoral or Postdoctoral Thesis Salmo salar Repositorio Digital Conicyt RI 2.0 (Comisión Nacional de Investigación Científica y Tecnológica) Cabeza ENVELOPE(-62.200,-62.200,-64.133,-64.133) |
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Prolactina (PRL), una hormona peptídica producida por la glándula pituitaria, juega un rol importante en la modulación del sistema inmune de vertebrados inferiores v _. . ' . . superiores. Con el propósito de investigar el efecto de PRL en la activación de fagocitos profesionales de peces se estimuló 'leucocitos .de cabeza de riñón, macrófagos purificados de dorada (Sparus aurata) y células SHK- l con varias concentraciones fisiológicas de PRL nativa de salmón y se analizó el estallido respiratorio y el perfil de expresión de citoquinas proinflamatorias. Los resultados muestran que PRL es capaz de inducir la producción de ROS y la expresión de IL-1 ~, TNF-a, p47phox, p67phox, gp91 phox e IRF-1. Todas las ' actividades de PRL fueron · bloqueadas con anticuerpo anti-PRL e inhibidores farmacológicos de las vías de señalización Jak/ Stat, PKC- y/o NF-KB. Adicionalmente, EMSA, HPLC/MS confirmó que Stat y NF-KB están involucrados en la activación de leucocitos de peces incubados con PRL. Finalmente, se clonó y secuenció los cDNAs codificantes de los componentes p47phox, p67phox y gp91phox del complejo NADPH oxida~a de salmón del Atlántico (Salmo salar) por medio de aproximaciones de clonación homóloga. Comparación de la secuencia aminoácida deducida, muestra que los componentes p47phox, p67phox y gp91phox de S. salar tiene un 51,45 y 68% de identidad con las subunidades de humanos, respect-ivamente. Adicionalmente, en este trabajo se muestra por primera vez que la activaciÓn de macrófagos en peces por PRL o lipopolisacárido promueve la activación de PKC la cual fosforila a p47phox, guiando a la activación de NADPH oxidasa y la .· generación de especies reactivas del oxígeno. Colectivamente, esta información identifica a PRL, como un regulador clave de la activación de fagocitos profesionales de peces y sugiere que el mecanismo de activación del complejo NADPH oxidasa está bien conservado desde peces hasta mamíferos. |
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