Lipasas termofílicas de origen antártico: efecto de líquidos iónicos

• Main Author: Muñoz-Torres, Patricio Alberto
• Other Authors: Blamey-Alegría, Jenny Marcela, Universidad de Santiago de Chile
• Format: Doctoral or Postdoctoral Thesis
• Language: Spanish
• Subjects: isla Decepción; Vio; Antártica
• Online Access: http://hdl.handle.net/10533/180010

Las lipasas son enzimas involucradas en la hidrólisis y síntesis de triglicéridos. Estas enzimas son aplicadas industrialmente debido al amplio espectro de reacciones que catalizan. Además, la industria está interesada en mejorar las reacciones catalizadas por estas enzimas mediante la utilización de líquidos iónicos. Sin embargo, el efecto de estas sales en los parámetros cinéticos de lipasas no ha sido estudiado anteriormente. En este estudio, se purificó cuatro lipasas a partir de sobrenadante del aislado ID17, un termófilo del género Geobaci/lus aislado de isla Decepción, Antártica. La producción de lipasas fue máxima en fase estacionaria de crecimiento cuando se utilizó triptona como fuente de carbono y nitrógeno, a pH 7,5. En estas condiciones, se obtuvo 4 picos diferentes con actividad lipasa (Lip1-4). Todas las lipasas fueron activas óptimamente a temperaturas sobre 65 oc y a pH alcalino. De estas enzimas, Lip1 mostró ser la más termoestable, reteniendo el 80% de su actividad luego de 8 h de incubación a 70 oc. Además, su actividad puede ser aumentada en presencia de SrCI2 1 mM. Los parámetros cinéticos de Lip1 fueron modulados por la presencia de los líquidos iónicos BmimPF6 y BmimBF4. La velocidad máxima de reacción de Lip1 aumentó en presencia de ambas sales. El mayor efecto se observó cuando se empleóBmimPF6, donde se observó mayor eficiencia catalítica. Sin embargo, esteparámetro no se vio alterado por BmimBF4. El aumento en la velocidad de reacción de Lip1 puede deberse a posibles cambios en la estructura de Lip1 ejercidos por BmimPF6 y BmimBF4, lo que fue evidenciado por cambios en la intensidad de fluorescencia de triptófanos de la enzima. En conclusión, la actividad hidrolítica de Lip1 es modulada por loslíquidos iónicos BmimBF4 y BmimPF6, que favorecen la velocidad de reacción yeficiencia catalítica de la enzima. Este efecto estaría dado por probablescambios en la estructura de Lip1 que favorecen su actividad catalítica.