一种适用于太平洋牡蛎高多态基因组单核苷酸突变验证的两步式高分辨率熔解曲线方法(英文)

• Main Authors: 王家丰, 齐海刚, 李莉, 张国范
• Format: Report
• Language: unknown
• Published: 2013
• Subjects: 长牡蛎(太平洋牡蛎); 单核苷酸突变; 基因分裂方法; 两步式高分辨率熔解曲线; Crassostrea gigas
• Online Access: http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/16773

长牡蛎(Crassostrea gigas)基因组具有高度的多态性。因此,导致传统的高分辨率熔解曲线(HRM)方法在长牡蛎基因组SNP分型验证中表现出很低的效率,并且传统HRM方法花费比较高。本文提出一种经过改良的适合高度多态性基因组SNP验证的HRM方法。这种two-step HRM方法在传统的HRM方法基础上进行了许多改进;利用这种改进的方法,使用一对引物即可准确完成一个特定SNP位点基因型的确定和区分,并且相应的花费较传统方法大大降低。本实验中共使用56组引物对长牡蛎SNP进行验证,有8组引物因为特异性较差在引物筛选中被排除。最终有30组引物成功验证SNP,成功率约为62.5%。超过63.