Comparative analysis of Vibrio splendidus-related strains isolated during Crassostrea gigas mortality events

• Published in: Aquatic Living Resources
• Main Authors: Le Roux, Frédérique, Gay, Melanie, Lambert, Christian, Waechter, Magali, Poubalanne, Saravanne, Chollet, Bruno, Nicolas, Jean-louis, Berthe, Franck
• Format: Article in Journal/Newspaper
• Language: English
• Published: Elsevier 2002
• Subjects: Vibrio splendidus; Virulence; Epidemiology; PCR RFLP; Oyster mortality; Pacific; Crassostrea gigas
• Online Access: https://archimer.ifremer.fr/doc/2002/publication-565.pdf; https://doi.org/10.1016/S0990-7440(02)01176-2; https://archimer.ifremer.fr/doc/00000/565/

French mollusc production is based mainly on the Pacific cupped oyster, Crassostrea gigas. Since 1991, annual mass mortality of juveniles has been reported during summer months. These recurring episodes concern professionals who fear that like Portugese oyster, C. angulata, C gigas could in turn disappear following one of these epizooties. Previously, bacteriological analysis of moribund oyster juveniles yielded an isolate of a Vibrio splendidus biovar H strain, named TNEMF6. This isolate was demonstrated to be pathogenic to Crassostrea gigas spat by experimental challenge. To study the association between summer oyster mortality and presence of TNEMF6 cluster strains, Vibrionaceae fauna were isolated from infected spat along the French Atlantic coast between 1997-1998. Strains related to V splendidus biovar II were selected. Comparison with TNEMF6 was performed by classical biochemical tests and polymerase chain reaction - restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) of SSU rDNA, rpoD, and gyrB genes. Genomic similarities were confirmed by DNA/DNA hybridization. Only one strain out of 14, TNNIII7, was found to be closely related to the pathogenic bacteria. Neither the phenotypic nor the genotypic markers used in this study were able to distinguish pathogenic from non-pathogenic strains of the widespread V splendidus. However, future genetic comparisons of TNEMF6 and TNNIII7 is likely to reveal genes involved in pathogenicity. La production française de mollusques est principalement basée sur la culture d'huîtres creuses Crassostrea gigas. Depuis 1991, en période estivale, de forts taux de mortalité de naissain d'huîtres creuses sont observés régulièrement en milieu naturel et en écloseries. Ces épisodes récurrents inquiètent les professionnels qui craignent qu'à l'instar de l'huître portugaise, C. angulata, C. gigas puisse disparaître à son tour, suite à une épizootie. Différentes souches bactériennes appartenant au genre Vibrio ont été associées à des mortalités de mollusques. Récemment, nous avons isolé une souche Vibrio splendidus biovar II, TNEMF6, pathogène de naissain d'huître creuse. Dans ce travail, nous avons recherché la présence de cette souche dans d'autres épisodes de mortalité estivale. La flore vibrionacée d'animaux sains et moribonds a été isolée et les souches apparentées à Vibrio splendidus biovar II ont été sélectionnées. Une comparaison des souches a été effectuée par phénotypage (39 tests biochimiques) et génotypage (PCR-RFLP SSU rDNA, rpoD et gyrB). Les homologies génomiques ont été confirmées par hybridation ADN/ADN. Seule, une souche sur 14, apparaît proche de ce vibrio pathogène. Cependant, les techniques phénotypiques et génotypiques utilisées dans ce travail ne permettent pas de distinguer les isolats pathogènes et non pathogènes. Cependant, les deux souches TNEMF6 et TNNIII7 vont être utilisées dans une approche de génomique comparative pour l'étude des supports moléculaires de la virulence.