Rol de Interleuquina 22 sobre la microbiota y la homeostasis intestinal durante un proceso inflamatorio inducido por la dieta en pez cebra (Danio rerio)

• Main Authors: Caruffo - Madrid, Mario
• Other Authors: Universidad Andres Bello
• Format: Report
• Language: unknown
• Published: 2023
• Subjects: Zebrafish IL-22 Microbiota; Biologia Molecular; Magallanes; Doble; Valparaíso; Bío Bío; General Bernardo O'Higgins; Antártica
• Online Access: https://hdl.handle.net/10533/49166

RESULTADOS OBTENIDOS: Para cada uno de los objetivos específicos, describa o resuma los resultados. Relacione las publicaciones y /o manuscritos enviados a publicación con los objetivos específicos. En la sección Anexos incluya información adicional que considere pertinente para efectos de la evaluación. La extensión máxima de esta sección es de 5 páginas (letra tamaño 10, Arial o Verdana). Objetivo 1. Determinar la función de IL-22 e identificar los linajes leucocitarios que la expresan durante un proceso de inflamación inducida por la dieta en larvas de pez cebra. 1.1 Identificar linajes leucocitarios que expresan IL-22 y su receptor IL-22R1 durante un proceso de enteritis. Con el fin de obtener individuos dobles transgénicos que expresaran Il-22 en célula inmunes, se cruzó la línea transgénica reportera de Il-22 tg(il22:mCherry) con otras líneas reporteras de neutrófilos (tg(Bacmpx:GFP)), macrófagos (tg(mpeg1:dendra2)) y linfocitos T tg(lck:GFP). Así, larvas doble transgénicas fueron alimentadas con una dieta control y una inflamatoria desde el quinto hasta el octavo día postfertilización (dpf) (Figura 1A) y luego de 12 horas de ayuno, se observaron al microscopio confocal (Leica TCS Sp8) en busca de células que presentarán una doble marca fluorescente, GFP+ mCherry+. Como control de inflamación se determinó el número de neutrófilos presentes en el intestino de peces alimentados con ambas dietas (Figura 1B, C). Figura 1. Identificación de linajes leucocitarios que expresen Il-22. A. Esquema de alimentación de las larvas. B. Cuantificación de neutrófilos mediante inmunohistoquímica contra GFP en larvas Tg(mpx:GFP)i114, imágenes representativas. C. Cuantificación de neutrófilos y análisis estadístico, t-test P < 0,0001. C. Esquema de una larva de pez cebra lateral y la región del intestino usada para buscar las poblaciones leucocitarias (En verde: mpx, neutrófilos; dendra2, macrófagos; lck, linfocitos T) que expresen Il-22 (rojo), frente a una dieta control o inflamatoria. Los resultados obtenidos mostraron ...